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Estudio funcional de microRNAs en parásitos cestodos 1Andrés Grecco, 2Natalia Macchiaroli, 1Marcela Cucher y 1Mara Rosenzvit.Institución: 1Laboratorio Biología Molecular de Hidatidosis, Instituto de Microbiología y Parasitología Médica (IMPaM), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET), Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires (UBA), Buenos Aires, Argentina. 2Laboratorio de Genómica y Bioinformática de patógenos, Instituto de Biociencias, Biotecnología y Biología traslacional (iB3), Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires (UBA). Contacto: andresgrecco1@gmail.comMesocestoides vogae es un parásito platelminto validado como modelo de laboratorio de laclase Cestoda. Esta clase incluye especies como Echinococcus granulosus y E.multilocularis que causan enfermedades desatendidas como equinococosis. Los microRNAs (miRNAs) son pequeños ARNs no codificantes que regulan la expresión génica a nivel post-transcripcional reconociendo sitios en el 3UTR de sus ARNm blanco e inhibiendo su expresión. miR-71 es un miRNA altamente expresado en parásitos cestodos, ausente en vertebrados y con genes blanco esenciales para la biología parasitaria, por lo que representa un potencial blanco terapéutico selectivo. Previamente se silenció miR-71 en cultivos celulares primarios de E. multilocularis. El objetivo de este trabajo es silenciar miR-71 en parásitos completos, en particular en tetratiridios (estadío larvario de M. vogae) e identificar sus genes blanco. Para llevar a cabo el silenciamiento de miR-71, se utilizaron antimiRs, oligonucleótidos complementarios al miRNA que al unirse al mismo bloquean su función. Previamente, se transfectaron tetratiridios con concentraciones crecientes de un oligonucleótido fluorescente y se observaron al microscopio confocal, para determinar las mejores condiciones. Luego se realizaron las transfecciones en 3 réplicas biológicas, lográndose un 65% de silenciamiento determinado mediante RT-qPCR. Se indujo laestrobilización de parásitos silenciados y control, y se observó mayor capacidad de estrobilización en los primeros. Estos resultados sugieren que miR-71 estaría involucrado en el mantenimiento del estadío larval, regulando negativamente la expresión de genes necesarios para la estrobilización. La verificación experimental de genes blanco de miR-71, ya predichos mediante herramientas bioinformáticas, está en curso. Estos resultados proveen una estrategia para estudiar la función de los miRNAs en parásitos cestodos y analizar su potencial como blancos de drogas de enfermedades parasitarias desatendidas.

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