Evaluación microbiológica del potencial antitumoral de extractos de Ganoderma lucidum

VICECONTE, FÁTIMA R.; VELA GUROVIC, SOLEDAD; BIDEGAIN, MAXIMILIANO ANDRÉS; CUBITTO, MARÍA AMELIA

Bahia Blanca

Congreso; XVII Jornadas Argentinas de Microbiologia; 2017

Ganoderma lucidum es una especie de hongo medicinal históricamente utilizada en países asiáticos para tratar una gran variedad de enfermedades y prolongar la vida. Dentro de las numerosas propiedades medicinales atribuidas a esta especie, se han reportado estudios que comprueban su actividad anticancerígena. Dada lagran diversidad de sus metabolitos bioactivos y el interés medicinal de los productos a base de G. lucidum, resulta necesario el desarrollo de métodos rápidos para la evaluación de su potencia biológica que permitan lacomparación entre productos distintos, formulaciones distintas, o variaciones entre lotes.El objetivo del presente trabajo es estimar la potencia biológica de extractos de G. lucidum mediante la adaptación de un ensayo in vitro para la determinación de actividad antitumoral. Este ensayo microbiológico se basa en la inducción de la respuesta SOS en una cepa de E. coli genéticamente modificada que, medianteexpresión del gen reportero lacZ, evidencia la presencia de agentes que interaccionan con el ADN.A partir de un extracto hidroalcohólico del cuerpo fructífero de G. lucidum se obtuvieron subextractos de distinta polaridad por extracción secuencial con solventes. Los sub-extractos fueron fraccionados por cromatografía en columna abierta con silicagel. Las fracciones de interés fueron caracterizadas por Resonancia Magnética Nuclear (RMN, 300 MHz, CDCl3). A los fines de ensayar la actividad, se prepararon diluciones de los subextractos secos y de las fracciones purificadas en dimetilsulfóxido. Se adaptó el método en microplacadescrito por Elespuru et al. (1986) utilizando la cepa E. coli ATCC 33312 y doxorubicina como control positivo.Se midió la absorbancia a 405 nm en modo cinético durante 30 minutos en un lector de microplacas SUNRISE (TEKAN). Los resultados fueron procesados por el software estadístico GraphPadPrism 5.Al compararse las curvas de absorbancia versus tiempo de los distintos tratamientos se observó una mayor actividad para el subextractohexánico. Una de las fracciones obtenidas por cromatografía se identificó como una mezcla de los ácidos grasos nonadecanoico (C19:0) y nonadecenoico (C19:1) mediante 1H y 13C RMN (Gao et al. , 2012). Esta fracción presentó una actividad similar al extracto hexánico, rico en lípidos y ácidos grasos, lo que sugiere que, en concordancia con la bibliografía, los principales compuestos responsables de laactividad antitumoral de G. lucidum serían los ácidos grasos de cadena larga.La puesta a punto del ensayo microbiológico permitió evaluar las propiedades antitumorales de los extractos obtenidos a partir del cuerpo fructífero de G. lucidum e identificar dos compuestos del tipo ácidos grasos comoresponsables de la actividad. Los resultados indican que este ensayo microbiológico resulta de utilidad para estimar la potencia antitumoral de productos a base de G. lucidum.