Análisis morfológico del efecto del estrés oxidativo en el plegamiento del tubo cardiaco de embriones de pez cebra.

HERRERA, IDALIA; ARMESTO, RUBINA; BINOLFI, ANDRES; LOMBARDO, VERÓNICA A.

Rosario

Jornada; II Jornadas CyT FBIOyF; 2023

FBioyF

Introducción: El plegamiento del tubo cardiaco es un proceso esencial y altamente conservado en todos los vertebrados. Anomalías en el mismo generan defectos cardíacos congénitos en humanos (1). El aumento en los niveles de las especies reactivas del oxígeno durante el embarazo influye en el desarrollo del embrión, específicamente en el desarrollo cardíaco (2,3). El pez cebra (Danio rerio), es un pequeño vertebrado que presenta múltiples ventajas para el estudio de la morfogénesis del corazón, como ser: su embriogénesis externa, la accesibilidad del corazón embrionario, su capacidad de sobrevivir varios días con un corazón anormal, y su gran homología genética con humanos (4). El objetivo del presente trabajo es caracterizar el proceso de plegamiento del tubo cardíaco en pez cebra y evaluar el efecto del estrés oxidativo sobre dicho proceso. Resulados: Para la caracterización del plegamiento del tubo cardíaco registramos periódicamente imágenes in vivo de corazones embrionarios durante dicho proceso utilizando un microscopio fluorescente en combinación con una línea reportera de pez cebra [Tg(myl7:eGFP)twu34] (5). Del análisis de dichas imágenes establecimos parámetros de medición como el área y el ángulo de posición de las cámaras cardiacas, y el área del canal atrio ventricular. Adicionalmente durante este proceso registramos otros parámetros cardiovasculares (velocidad relativa del flujo sanguíneo, maduración de los glóbulos rojos y frecuencia cardíaca) que determinan el desarrollo normal del corazón (6). Por último, tratamos los embriones con diferentes agentes oxidantes de efecto agudo y gradual durante el plegamiento del tubo cardíaco. Conclusión: Caracterizamos in vivo el proceso de plegamiento del tubo cardíaco en embriones de pez cebra. Determinamos parámetros cuantitativos que describen de manera suficiente los cambios morfológicos más evidentes durante dicho proceso. Evidenciamos que condiciones de estrés oxidativo producen alteraciones en el normal plegamiento del tubo cardiaco en embriones de pez cebra.Referencias: (1) Ramsdell, Dev Biol, 2005, 288:1-20. (2) Erickson et al., 2008 Cell, 133, 462–474 (3) Hobbs et al., 2005 The American Journal of Clinical Nutrition, 81, 147-153 (4) Bakkers, Cardiovascular Research, 2011, 10.1093/cvr/cvr098. (5) Huang et al., Dev Dyn., 2003, 228, 30-40. (6) Dietrich et al., Dev Cell, 2014, 30:367-377.