Análisis del efecto del estrés oxidativo durante el plegamiento del tubo cardíaco

ARMESTO, RUBINA; HERRERA, IDALIA; BINOLFI, ANDRES; LOMBARDO, VERÓNICA A.

Rosario

Jornada; XVI Jornadas de Ciencias, Tecnologías e Innovación; 2022

UNR

El pez cebra (Danio rerio) es un pequeño vertebrado utilizado como modelo para el estudio del desarrollo del corazón y enfermedades cardiovasculares (1). El plegamiento del tubo cardíaco es un proceso morfogenético conservado y anormalidades en dicho proceso están asociadas a defectos cardíacos congénitos en humanos (2). Un aumento en los niveles de las especies reactivas del oxígeno promueve la activación constitutiva de la quinasa II dependiente de Ca2+ y calmodulina (CaMKII), evento asociado con varias enfermedades cardíacas (3). Dicha activación involucra la oxidación de la enzima, siendo esta modificación postraduccional reversible vía la enzima Metionina Sulfóxido Reductasa A (MSRA) (4). En el presente trabajo nos proponemos analizar cómo la exposición a condiciones de estrés oxidativo afecta el proceso de plegamiento del tubo cardíaco, y si dicho estrés modula la expresión e interacción regulatoria de Camk2 y Msra en el tejido cardíaco. Para analizar el efecto del estrés oxidativo sobre la morfogénesis del corazón utilizamos una línea reportera de pez cebra [Tg(myl7:eGFP)twu34](5), que expresa la proteína GFP en el tejido cardíaco, y observamos que el tratamiento oxidativo interfiere con el plegamiento del tubo cardíaco de manera dosis-dependiente. Realizamos un análisis in sílico de los genes camk2 y msra del pez cebra y encontramos siete genes para camk2 (a, b1, b2, d1, d2, g1, g2), y un gen para msra. Para analizar los niveles de expresión de dichos genes diseñamos oligos específicos y realizamos ensayos cuantitativos de la reacción en cadena de la polimerasa (qPCR) durante el plegamiento del tubo cardíaco, observando un aumento de 30 veces para el transcripto camk2d2 al final de dicho proceso. En conjunto, estos hallazgos contribuyen a comprender el papel de la regulación oxidativa durante el desarrollo cardíaco normal y anormal.Referencias: (1) Leong, et al., Acta Physiol., 2010, 199, 257-76. (2) Schleich, et al, Arch. Cardiovasc. Dis., 2013, 106, 612-23. (3) Swaminathan, et al, Circ. Res., 2012, 110, 1661-77. (4) Erickson, et al., Cell, 2008, 133, 462-74. (5) Huang et al., Dev Dyn., 2003, 228(1), 30-40.