VMP1 COMO INTERMEDIARIA ENTRE LA INDUCCIÓN Y LA PROGRESION ESTRUCTURAL DE LA ZIMOFAGIA

TAMARA ORQUERA; DANIEL GRASSO; MARÍA INÉS VACCARO

Mar del Plata

Congreso; CONGRESO SAIC-SAFIS; 2015

SAIC y SAFIS

La pancreatitis aguda (PA) es causada por la activación prematurade los gránulos de zimógenos (GZ). Esto produce la autodigestión de laglándula, con respuesta necro-inflamatoria que puede conducir a la muerte. Lamayoría de las PAs son autolimitadas, evidenciando la importancia de losmecanismo de respuesta al estrés de las células  acinares pancreáticas. Hemos descripto la autofagiaselectiva de los GZ activados durante la PA, denominada zimofagia. La zimofagiaes mediada por VMP1 y es capaz de prevenir y contener los efectos injuriosos dela activación de los GZ. El objetivo fue entender la dinámica de VMP1 en elproceso autofágico. Determinamos que VMP1 se encuentra inicialmente en el ERcomo estructura preautofagosomal, colocalizando con marcadores de la vía deseñalización (ULK1) y de la estructura autofagosomal (LC3, WIPI2). Probamos queun porcentaje de los autofagosomas mediados por VMP1 pasan a través deanfisomas, pero el complejo PI3K reclutado por el dominio AtgD de VMP1 es específicodel autofagosoma. Además VMP1 prosigue en la membrana autofagosomal hasta lafusión con el lisosoma. Analizando posibles modificaciones postraduccionales deVMP1, construimos mutantes de sitios seleccionados. De estos destaca lafosforilaciónen Thr25. La dominante negativa (T25A) es incapaz de gatillar autofagia,mientras la constitutivamente fosforilada (T25D) dicha capacidad estáincrementada. Por otra parte, VMP1 deficiente deAtgD fué incapaz de reclutar alcomplejo PI3K e incluso de salir del ER. Sin embargo, ésta colocaliza con ULK1.Los resultados sugieren que VMP1 posee al menos dos regiones funcionales separadas,la Nt probablemente fosforilada por ULK1 y el nexo con la vía de señalización yel Ct asociado al reclutamiento del complejo PI3K necesario para el progresoestructural de la formación del autofagosoma. Proponemos que VMP1 posee unpapel como plataforma y acoplante entre la inducción de la autofagia ylaformación del autofagosoma.