La sobre-expresión del REβ inhibe la expresión del REα endógeno modulando la proliferación de células tumorales adenohipofisarias GH3

PABLO A. PÉREZ; JUAN P. PETITI; MARÍA E. SABATINO; FLORENCIA PICECH; CAROLINA B. GUIDO; ANA L. DE PAUL; ALICIA I. TORRES; SILVINA GUTIERREZ

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Fissiologia (SAIC y SAFIS)

En estudios previos mostramos que el REβ inhibe la proliferación celular adenohipofisaria mediante la modulación de reguladores del ciclo celular como ciclina D1 y p21. A continuación y considerando estos antecedentes nos propusimos dilucidar si el REβ modula la expresión del REα contribuyendo así al mantenimiento del balance proliferativo adenohipofisario.Se utilizaron cultivos de células adenohipofisarias normales y tumorales GH3 (GH3β-). Esta línea celular fue transfectada para la sobre-expresión del REβ (GH3β+). Se realizaron estímulos con 10 nM de E2, PPT (agonista del REα) y DPN (agonista del REβ) por 72h. Se determinó la proliferación celular (con BrdU), el contenido de ADN (con yoduro de propidio) y la expresión de REα y β por western blot (WB), inmunofluorescencia (IF) y citometría de flujo. Análisis estadístico: Anova-Dunnet. La sobre-expresión del REβ en células GH3 en condiciones basales inhibió la proliferación celular alrededor del 40% y disminuyó significativamente la población en fases S+G2/M del ciclo celular. Este efecto inhibitorio no mostró cambios luego del tratamiento con E2, PPT o DPN. En GH3β+ se observó una reducción significativa de la expresión del REα endógeno, la cual se mantuvo en niveles similares luego de la estimulación con E2, PPT o DPN. La expresión del REβ en GH3β+ no varió con ninguno de los tratamientos aplicados. En células adenohipofisarias normales se observó por IF una inmunomarcación difusa citoplasmática del REβ en el 16,97 ± 2,3% de las células, de las cuales el 91,48 ± 2,64% expresaron además el REα (15,61 ± 2,42% del total de células). Nuestros resultados muestran que el REβ inhibe la expresión del REα modulando así la proliferación celular adenohipofisaria de manera ligando independiente. Además, la elevada co-expresión de los REα y β sugiere un mecanismo de acción integrado de ambos subtipos de RE en sus efectos biológicos sobre las células adenohipofisarias.