LA SOBRE-EXPRESIÓNDEL FACTOR SOX2 INDUCE UN CAMBIO MORFO- FUNCIONAL DE CÉLULAS TUMORALES HIPOFISARIAS GH3 HACIA UN FENOTIPO INDIFERENCIADO

CAROLINA B. GUIDO; ALICIA M. VACA; LILIANA DEL VALLE SOSA; FABIOLA VELASQUEZ; PABLO A. PÉREZ; BEATRIZ CAPUTTO; SILVINA GUTIERREZ; JORGE H. MUKDSI; ALICIA I. TORRES

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunion Anual de la Sociedad de Investigación Clinica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Resultados previoshan permitido inferir que célulashipofisarias que expresan marcadores de células stem (CS) y cancerstemcells (CSC)estaríaninvolucradas en la etapas tempranas del desarrollo tumoral. Recientemente, en adenomas hipofisariosse ha descripto que lasobre-expresión delfactor de transcripción Sox2,asociado a CS, estaría vinculada a la progresión tumoral.El objetivo de este trabajo fue seleccionar y caracterizar la población de células que crecen en suspensión como esferoides y expresan marcadores de CS y CSC a partir de cultivos primarios de tumores hipofisarios. Además, se propone analizar si la sobreexpresión de Sox2 modificael comportamiento de la línea tumoral hipofisaria GH3.Se utilizaron cultivos de tumores hipofisarios de ratas hembras Fischer estrogenizadas por 30 días, con medios de selección para la obtención de pituesferas y de células GH3 transducidas con un vector retroviral que expresa Sox2 y GFP. Se realizó inmunofluorescencia para la detección de marcadores asociados a CS y CSC yanálisis morfológico ultraestructural. Se determinó el metabolismo y la viabilidad celular en GH3 porensayo de AlamarBlue.Las pituesferas obtenidas fueron positivas paraGFRa2, Sox2, Oct4, Nestin, CD133 y CD44 y luego de la diferenciación con medio suplementado expresaron S100, vimentina y GFAP. La sobre-expresión de Sox2 en células GH3 indujo cambios ultraestructurales indicativos de indiferenciación celular incrementando además, el número de figuras mitóticas, la capacidad de formar esferoides, el metabolismo y la viabilidad celularcon respecto a las GH3 control.Los resultados obtenidos demuestran que las pituesferas aisladas en cultivo poseen capacidad pluripotente y estarían involucradas en el desarrollo de adenomas hipofisarios. La formación de esferoides y las características morfológicas de células GH3 que sobre-expresan Sox2 evidencianun fenotipo más indiferenciado, sugiriendo un rol activo de este factor en la tumorogénesis hipofisaria