¿Es posible utilizar la solución Bes-Gluconato-Polietilenglicol (BGP-CS) para preservar tanto hepatócitos aislados como hígados para trasplante?

CARNEVALE M.E.; TOMATIS C.; OSORIO J.S.; GUIBERT E.E.; RODRIGUEZ J.V.

Rosario

Jornada; XII Jornadas de Ciencia y Tecnología; 2018

Secretaría de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Rosario

Previamente, nuestro grupo de investigación hadescrito diversos resultados y aplicaciones de la solución de preservaciónBGP-HMP, formulada inicialmente para la perfusión hipotérmica de órganos paratrasplante. Una subsecuente modificación en la concentración depolietilenglicol (PEG) la convirtió en una solución de preservación másversátil, y fue  renombrada como soluciónBGP-CS para preservación estática. El objetivo del presente trabajo es investigarla potencial aplicación de la misma en dos modelos experimentales diferentes:hígados enteros y hepatocitos aislados de ratas. Hepatocitos aislados de hígados de ratas SD fueronincubados en Buffer Krebs-Heinseleit (control) o preservados durante 24 h en lasolución BGP-CS a 5°C. Ambos grupos fueron evaluados inmediatamente (t0)y luego de 1 h de calentamiento a 37°C. La integridad de la membrana fueestudiada por la técnica de exclusión de Trypan blue (TBE) y por la tinción conIoduro de propidio/Hoechst (Pi/H). El metabolismo celular fue estudiado por lastécnicas de clivaje de fluoresceína diacetato (FDA)-Pi, metabolización del MTTy determinando la velocidad de consumo de oxígeno. Por otro lado, hígadosaislados de ratas SD de aproximadamente 300 g fueron preservados durante 24 h a5°C con la solución de preservación BGP-CS, y posteriormente evaluados en unsistema de perfusión ex vivo. Losresultados fueron comparados con los obtenidos para hígados sin preservar, loscuales se reperfundieron inmediatamente durante 90 min a 37°C en el mismosistema (grupo control). Se estimaron parámetros como la presión portal (PP),flujo portal (FR), liberación de enzimas hepáticas, tasa de consumo de O2,contenido de glucógeno, producción de urea y flujo biliar (BF). Además secalculó la resistencia intrahepática (IR).Los estudios de viabilidad y funcionalidad delos hepatocitos aislados luego de ser preservados en hipotermia durante 24 hcon la solución BGP-CS mostraron resultados similares a los del grupo control (n= 8, p > 0.05). Los hígados preservados no mostraron diferenciasestadísticamente significativas con respecto al grupo control para losparámetros hemodinámicos y metabólicos (PP, FR, IR, BF y consumo de oxígeno)luego de 90 min de reperfusión. Las reservas de glucógeno, así como laliberación de enzimas hepáticas fueron mayores que para el grupo control (p< 0.05). En ambos casos no se observaron cambios morfológicos (dilataciónsinusoidal, presencia de vacuolas, alteraciones en la membrana y en el núcleo,etc.) luego de la preservación.Nuestros resultados confirman que la solución depreservación BGP-CS puede preservar durante 24 h la integridad de membrana ymantener el metabolismo activo en hepatocitos aislados, así como también enhígados de rata aislados, sugiriendo aplicaciones más amplias para nuestrasolución. Experimentos in vivoposteriores, tales como el trasplante preclínico, son necesarios para verificary explorar el verdadero potencial de la solución de preservación propuesta.