24 Horas de Perfusión Hipotérmica en Hígados de Ratas: Efectos Sobre la Composición de la Bilis

CARNEVALE M.E.; MÉJICO G.; BALABAN C.L.; GUIBERT E.E.; RODRIGUEZ J.V.

Rosario

Jornada; VII Jornadas de Ciencia y Tecnología; 2013

Secretaría de Ciencia y Tecnología de la UNR

El sistema de perfusión hipotérmica continua para preservar hígados es una etapa previa al trasplante y representa una estrategia alternativa para el rescate de hígados provenientes de dadores marginales. Las condiciones de funcionamiento ideales de este sistema para ser aplicado en la preservación de hígados, aún no han sido definidas. Una cuestión clave a estudiar es el efecto causado por composición de la solución sobre el mantenimiento de la viabilidad y función hepática durante la reperfusión normotérmica. El objetivo de nuestro estudio fue analizar el flujo y la composición de la bilis luego de 24 h de perfusión hipotérmica en una maquina diseñada a tal propósito (HMP), y utilizando una nueva solución de preservación. Se canularon el conducto biliar y la vena porta de ratas Wistar, luego fue extraído el hígado, lavado y conectado a un sistema de perfusión recirculante con 250 mL de la solución BGP-HMP (BES-Gluconate-Polyethylene Glycol) a 5C y a un flujo de 5 mL/min (Carnevale M, Cryobiology 65:357, 2013). Los hígados fueron perfundidos 24 h a una presión portal constante de 40 mmH2O (25 % de la presión portal normotérmica). La reperfusión a 37°C se realizó en un sistema ex vivo (IPRL) con solución de Krebs-Henseleit Dextran (Balaban CL, Artif Organs 35(5):508-15, 2011). Fueron estudiadas la funcionalidad hepática, el daño tisular y la composición de la bilis en dos grupos experimentales: I- Hígados recién obtenidos y reperfundidos 90 min en el IPRL; II- Hígados sometidos a 24 h de HMP y luego reperfundidos en el IPRL. Se determinaron las oscilaciones del pH del perfusato, el flujo de perfusión y la liberación de la enzima LDH. También se determinó el flujo biliar y el consumo de O2. A través de las muestras de bilis recogidas durante el IPRL se estableció la velocidad de excreción biliar de electrolitos (Na+, K+, Cl-), colesterol (CHO), fosfolípidos (Pi) y ácido taurocólico (TC). Viabilidad y función hepática durante la reperfusión normotérmica: el flujo portal y la resistencia intrahepática (IR) no mostraron diferencias entre grupos. La liberación de LDH mostró diferencias significativas entre los grupos, el tratamiento con la HMP mostró mayores valores que el grupo I. Con respecto al consumo de O2, los hígados que sufrieron HMP fueron capaces de consumir más O2 que los hígados del grupo I. El tratamiento con HMP produce una disminución del flujo biliar respecto del grupo I (I: 1.170.09; II: 0.42±0.25 L/min/g.híg, n=5, p