Analisis por Western blot de metalotioneínas en Palaemonetes argentinus (Crustacea, Palaemonidae) expuesto a distintas concentraciones de cadmio

CHIODI BOUDET, L. N., MENDIETA, J., CHISARI, A. Y GERPE, M.S

Lima

Congreso; IX Congreso de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC LA) (II Congreso SETAC Perú) – Ecotoxicología y Responsabilidad Social; 2009

Sociedad de Toxicología y Química Ambiental Latina (SETAC LA)

Las metalotioneínas son proteínas citosólicas de bajo peso molecular, con altos porcentajes de cisteína (-SH) y termoestables. Están involucradas en la homeostasis y detoxificación de metales divalentes, pudiendo ser su síntesis de novo inducida tanto por metales esenciales en exceso (cinc, cobre) como por metales sin funciones fisiológicas conocidas (cadmio). El objetivo de este trabajo fue evaluar la inducción de metalotioneínas en el camarón de agua dulce Palaemonetes argentinus expuesto a cadmio. Individuos juveniles fueron mantenidos durante 24 horas a concentraciones crecientes de  CdCl2 acuoso (0, 0.05, 0.1, 0.5 y 1.0 mg/l). A partir de cada ejemplar se obtuvo el tejido muscular y el tejido visceral, los cuales se analizaron en pooles por concentración (n: 50 individuos/pool). Los tejidos homogeneizados con solución salina (NaCl 0.9%) fueron calentados a 80°C durante 10 minutos, obteniendo la fracción de proteínas termoestables. Las mismas fueron cuantificadas por el método colorimétrico microbicinconínico. Cantidades iguales de proteínas (60 ug) fueron separadas mediante electroforesis en geles desnaturalizantes de poliacrilamida 12 % (SDS-PAGE). La detección de metalotioneínas fue realizada mediante la técnica de Western blot utilizando el anticuerpo primario anti-MT y el anticuerpo secundario fluorescente Zy-MaxTM. Las bandas obtenidas fueron cuantificadas con el programa ImageQuant 5.2. Los resultados obtenidos en músculo revelaron un aumento en los niveles de metalotioneínas dependiente de la dosis de cadmio, mientras que esta tendencia no fue tan clara en el tejido visceral. Esto podría estar indicando una regulación diferencial de estas proteínas en ambos tejidos en presencia de cadmio.