Efecto inmunomodulador y antitumoral de la terapia combinada entre la transferencia génica de la interleuquina-12 (IL-12) y una dosis baja de ciclofosfamida en las metástasis hepáticas de cáncer de colon experimental.

MARIANA MALVICINI; FLAVIA PICCIONI; FEDERICO PIÑERO; CATALINA ATORRASAGASTI; JUAN BAYO; ESTEBAN FIORE; LAURA ALANIZ; MARIANA GARCIA; JORGE AQUINO; O. GRACIELA SCHAROVSKY; MARCELO SILVA; PABLO MATAR; GUILLERMO MAZZOLINI

Buenos Aires

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011

Asociación Argentina para el Estudio de las Enfermedades del Hígado (A.A.E.E.H.)

Introducción: La interleuquina 12 (IL-12) es una citoquina de particular interés en la inmunoterapia del cáncer debido a su papel crítico en la estimulación de la inmunidad mediada por células; sin embargo, su efectividad está limitada por sus efectos tóxicos y el estado de inmunosupresión generado en los pacientes con cáncer. Previamente demostramos que la ciclofosfamida (Cy) en dosis bajas tiene propiedades inmunopotenciadoras y en algunos casos efectos antitumorales en modelos experimentales. Objetivos: El objetivo de este trabajo fue evaluar los efectos biológicos de la combinación de Cy y posterior inmunoterapia génica empleando un vector adenoviral que expresa los genes de la IL-12 murina (AdIL-12), en un modelo de metástasis hepáticas de cáncer de colon en ratones. Materiales y métodos: Se inocularon células de adenocarcinoma de colon murino CT26 (5 x105/0.05ml/animal) por vía intrahepática directa en ratones macho adultos Balb/c (día 0). Los animales se distribuyeron en grupos (n=6/grupo) de la siguiente manera:: grupo combinado: Cy (dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7) y AdIL-12 (dosis única, 109 PFU, i.v/24hs post-Cy); grupo Cy: dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7; grupo IL-12: dosis única, 109 PFU de AdIL-12, i.v a día 8; grupo salino; grupo Cy (dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7) y Ad-beta-gal (vector control, (dosis única, 109 PFU, i.v/24hs post-Cy). Se evaluó el volumen tumoral al finalizar los experimentos (día 20). Se tomaron muestras de sangre periférica y órganos linfoides para realizar estudios inmunológicos. Resultados: Ambos tratamientos por separado, Cy o Ad-IL-12 produjeron individualmente resultados similares: reducción del tamaño tumoral de 60-70% respecto del control, y un 20% de regresiones tumorales totales. En cambio, el tratamiento combinado de Cy+ Ad-IL-12 produjo una reducción del volumen tumoral de 98%, y regresión tumoral en el 47% de los animales tratados. Además, aumentó significativamente la sobrevida de los animales. El grupo tratado con un adenovirus control (Ad-beta-galactosidasa) combinado con Cy se comportó de manera similar al grupo control sin tratamiento. Por otra parte, el monitoreo de la respuesta inmunológica muestra que la combinación de Cy+AdIL-12 produjo una reducción significativa en el porcentaje de linfocitos T reguladores(Tregs) periféricos y esplénicos (7.9% y 6.0%, respectivamente), e indujo un aumento en el porcentaje de células dendríticas (CDs) esplénicas activadas (4,8%) y de linfocitos T CD4+ productores de INF-(6.3%). Además, el tratamiento combinado incrementó significativamente la tasa de proliferación linfocitaria e indujo una mayor respuesta citotóxica específica (CTLs). El examen histológico evidenció extensas zonas de necrosis e infiltrado inflamatorio y un aumento en el número de células apoptóticas en el grupo combinado. Conclusiones: El efecto antitumoral sinérgico del tratamiento con Cy + AdIl-12 podría deberse, al menos en parte, a la exacerbación de la respuesta inmunitaria antitumoral generada a través de la eliminación de mecanismos supresores y una concomitante activación de la respuesta inmunitaria celular específica.