Efectos antitumorales de un inhibidor de la síntesis de ácido hialurónico en un modelo murino de hepatocarcinoma ortotópico

FLAVIA PICCIONI; MARIANA MALVICINI; MIGUEL RIZZO; NESTOR KIPPES; CATALINA ATORRASAGASTI; ANDREZ RODRIGUEZ; MARCELO AMANTE; ESTEBAN FIORE; JUAN BAYO; JORGE AQUINO; MARIANA GARCIA; LAURA ALANIZ; GUILLERMO MAZZOLINI

Buenos Aires

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011

Asociación Argentina para el Estudio de las Enfermedades del Hígado (A.A.E.E.H.)

Introducción: La cirrosis se caracteriza por una acumulación excesiva de componentes de la matriz extracelular, entre los que se encuentra el ácido hialurónico (HA). Dicho proceso puede ser considerado una enfermedad pre-neoplásica que favorece la aparición del hepatocarcinoma (HCC). En la mayoría de los tumores la biosíntesis alterada de HA se asocia con mecanismos que favorecen la progresión tumoral, sin embargo su papel en el HCC aún no está claro. 4-methylumbelliferona (4MU), un agente oral biodisponible, es un inhibidor específico de la síntesis de HA con propiedades antitumorales en ciertos tipos de cáncer, como próstata y melanoma. El objetivo del presente trabajo fue analizar si la inhibición de la síntesis de HA por 4MU durante el desarrollo de la fibrosis hepática afecta la tumorogénesis en un modelo de HCC ortotópico establecido en ratones. Materiales y métodos: Utilizamos un modelo murino de HCC ortotópico, inoculando 1,25x105 células Hepa129 por inyección subcapsular en hígados con fibrosis avanzada inducida por tioacetamida (200 mg/kg, 3 veces por semana durante 28 días). Posteriormente, los animales fueron tratados con 4MU por vía i.p. a dosis de 20mg/kg/día durante 14 días. Evaluamos los efectos biológicos de 4MU en células de HCC (Hepa129) y en una línea de células estrelladas hepáticas (HSCs) in vitro, analizando proliferación por incorporación de 3H, apoptosis por naranja de acridina y bromuro de etidio y citotoxicidad por detección de la actividad LDH. Se analizó el crecimiento tumoral mediante medición con calibre del nódulo principal y sus nódulos satélites, el nivel de HA en suero mediante ELISA. Se estableció el estadio de fibrosis según el índice Metavir (F0: sin fibrosis, F4: cirrosis); además, se estudió el grado de activación de las HSC mediante la cuantificación del área positiva para actina de músculo liso. Resultados: El tratamiento del HCC con 4MU inhibió significativamente la proliferación de células tumorales e indujo su apoptosis; a su vez, el cultivo primario de hepatocitos no se vio afectado lo que refleja la baja toxicidad de 4MU. La terapia con 4MU redujo los niveles hepáticos y sistémicos de HA. El análisis histológico de los tumores provenientes de animales tratados con 4MU mostraron extensas áreas de necrosis, infiltrado inflamatorio y reducción de 2-3 veces del número de nódulos satélites. Además, no se observaron signos de toxicidad y los niveles de ALT no se modificaron tras la terapia con 4MU. Los animales tratados con 4MU mostraron una reducción en el grado de fibrosis en comparación a los controles (F1-2 vs F2-3, espectivamente). 4MU indujo apoptosis de HSCs in vitro y redujo la cantidad de HSCs activadas in vivo. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que 4MU tiene efectos terapéuticos beneficiosos en un modelo de HCC asociado a fibrosis lo cual amerita profundizar en su estudio.