Células de Langerhans: su participación en una vacuna experimental contra melanoma B16-F1 murino

M.S. RUIZ; S. GAZZANIGA; S. MAC KEON; S. CAMPISANO; A.I. BRAVO; R. WAINSTOK

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica-Reunión Sociedad Argentina de Fisiología 2011-II Congreso Nacional AACYTAL-IV Reunión Científica Regional por el Bienestar del Animal del Laboratorio y el Progreso de la Ciencia; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Sociedad Argentina de Fisiología, AACYTAL

Las células de Langerhans (CL) son un subtipo de células dendríticas (CD) presentes en la epidermis. El objetivo general de este trabajo fue evaluar su participación en el mecanismo de protección antitumoral producida por la vacunación con CD cargadas con células de melanoma murino B16 apoptóticas/necróticas (Apo/Nec). Se evaluó la distribución de CL en el sitio de vacunación por inmunohistoquímica en cortes de pieles normales y sitios vacunados, a 24hs y 120hs post-vacunación. Se midió la capacidad migratoria de CD cutáneas ex vivo en respuesta al medio condicionado de CD-Apo/Nec, CD solas y Apo/Nec solas. Se analizó la capacidad de las CL de fagocitar células Apo/Nec in vitro, mediante cocultivo de suspensiones epidérmicas con Apo/Nec, ambas marcadas con colorantes vitales fluorescentes, y citometría de flujo. Resultados: a 24hs y 120hs post-4 vacunas CD-Apo/Nec se observó reclutamiento de células Langerina+ en sitios vacunados, localizadas principalmente en el infiltrado inflamatorio que rodea a la vacuna. No se detectaron diferencias en el número de células que migraron en respuesta al medio condicionado CD-Apo/Nec, CD ó Apo/Nec en comparación con el control (RPMI) (ANOVA 1 factor, p>0,05). En los ensayos de fagocitosis in vitro, las suspensiones epidérmicas utilizadas presentaron (3,4±2)% de células Langerina+. A las 24hs de cocultivo se registró un (6±2)% de fagocitosis, definida como el % de células doble positivas. Conclusión: ya que el sitio de vacunación ha sido descripto anteriormente como una estructura de tipo pseudolinfoide terciaria, con posible actividad en la generación de una respuesta inmune, la presencia de CL, formando parte del infiltrado inflamatorio, y su capacidad de fagocitar células Apo/Nec in vitro, sugieren una posible función de las CL como células captadoras de antígenos tumorales en el sitio de vacunación.