Avaliação do efeito da Ambruticina sobre o fungo patogênico Trichophyton rubrum e validação de um sistema de infecção de pele ex vivo para estudos moleculares

PERES NT; GRAS DE; SANCHES PR; FALCÃO JP; ROCHA LB; ROSSI MA; MAZUCATO M; PRADE RA; MARTINEZ-ROSSI NM

Brasilia

Congreso; XXIV Congresso Brasiliero de Microbiologia; 2007

Sociedade Brasileira de Microbiologia

Infecções fúngicas são cada vez mais freqüentes em humanos, porém os antifúngicos usados no tratamento de micoses atuam sobre um número limitado de alvos celulares. Assim, a descoberta de novos alvos celulares e o desenvolvimento de novas drogas são extremamente necessários para o controle eficaz dessas infecções. A ambruticina é uma droga com potencial antifúngico, provavelmente interferindo na regulação osmótica dos fungos, acarretando acúmulo de glicerol e morte celular. O fungo antropofílico Trichophyton rubrum é comumente isolado de lesões de pele e unha, mas pouco se sabe sobre sua biologia e os processos que governam sua patogenicidade. O objetivo deste trabalho é avaliar a eficácia de um sistema de infecção de pele ex vivo para a realização de estudos moleculares sobre as interações patógeno-hospedeiro, e avaliar o efeito da ambruticina em T. rubrum. A concentração inibitória mínima da droga foi determinada e seu efeito no crescimento das hifas e durante a infecção de pele, avaliados por microscopia. Os resultados mostram inibição do crescimento de T. rubrum por baixas concentrações da droga e que uma dose sub-letal leva a um inchaço na ponta da hifa, provavelmente pelo acúmulo de metabólitos. Para validar o sistema de infecção, fragmentos de pele humana foram infectados com conídios de T. rubrum, na presença ou não da droga, e a adesão e germinação foram observadas por microscopia eletrônica de varredura. Após remoção do fungo e extração de RNA, a metodologia de hibridação subtrativa supressiva foi usada identificando genes induzidos e reprimidos em T. rubrum pela droga, avaliando sua ação no modelo de infecção ex vivo. Conclui-se que o sistema de infecção de pele ex vivo é adequado para estudos moleculares da interação patógeno-hospedeiro de infecções cutâneas e na avaliação do efeito de drogas antifúngicas, e que T. rubrum é sensível a baixas concentrações de ambruticina, causando um inchaço das hifas.