Genes diferencialmente expressos em Trichophyton rubrum na presença do antifúngico itraconazol

COELHO LM; SEGATO F; PAIÃO FG; GRAS DE; SILVEIRA HC; MARTINEZ-ROSSI NM

Foz do Iguaçu

Congreso; 52° Congresso Brasileiro de Genética - 12° Congresso da Asociación Lationamericana de Genética; 2006

Sociedade Brasileira de Genética

O fungo filamentoso Trichophyton rubrum e um dos patogenos mais prevalente entre as micoses. Este fungo utiliza substratos queratinizados como fonte de carbono, e e especializado nas infeccoes superficiais na pele, cabelo e unhas humanas. Infeccoes por T. rubrum em pacientes com o sistema imunologico comprometido sao mais graves, pois este fungo coloniza rapidamente a epiderme, podendo invadir o tecido subcutaneo. Estudos envolvendo este patogeno se tornaram relevantes, pois linhagens resistentes a alguns antifungicos tem sido relatadas com frequencia, o que sugere a necessidade de estender o conhecimento sobre a biologia desse fungo. O antifungico itraconazol e um derivado triazolico sintetico que apresenta largo espectro de acao e efeito toxico bastante reduzido, atua na inibicao da sintese do ergosterol, principal esterol na membrana plasmatica de fungos. O presente trabalho teve como objetivo identificar genes diferencialmente expressos da linhagem selvagem H6 de T. rubrum em resposta a presenca do antifungico itraconazol. Para este estudo a metodologia empregada foi a construcao de uma biblioteca subtrativa supressiva, utilizando um pool de cDNA obtidos a partir da exposicao de T. rubrum por 15 minutos a diferentes antifungicos. Os fragmentos de cDNA diferencialmente expressos foram amplificados por PCR, clonados, sequenciados e a maior expressao de alguns genes na presenca de itraconazol foi confirmada por reverse northern blot. Atraves da analise por bioinformatica (Crossmatch, CAP3, BlastX) as sequencias obtidas mostraram significativa similaridade com proteinas de outros microrganismos, tais como um gene que codifica um transportador ABC de Candida glabrata, responsavel por resistencia a multiplas drogas, uma DNA polimerase gama envolvida no reparo e replicacao de Aspergillus fumigatus, ou ainda uma proteina pol, elemento de transposicao (transposons) do fungo Colletotrichum gloeosporioides. Em bacterias, plantas e leveduras os transposons sao responsaveis pela resposta adaptativa ao estresse ambiental, sugerindo que em T. rubrum, eles estao envolvidos na resposta ao estresse provocado pelo itraconazol. Outros genes nao apresentaram similaridade nos bancos de dados, podendo ser genes exclusivos de T. rubrum.