Efecto del co-cultivo de dos basidiomicetes en la secreción de enzimas involucradas en la remoción de Bifenilos Policlorados (PCBS)

SADAÑOSKI, M.A.; TATARIN, A.S.; BARCHUK, M.L.; ZAPATA, P.D.; LEVIN, L.N.; VILLALBA, L.L.

Mar del Plata

Congreso; IV CAMAyA - I MICROGEN; 2018

Asociación Argentina de Microbiología

Los hongos de pudrición blanca secretan enzimas oxidativas e hidrolíticas que podrían estar implicadas, directa o indirectamente, en la remoción de PCBs. El objetivo del siguiente trabajo fue determinar el perfil proteico y la actividad enzimática lacasa (Lac), manganeso peroxidasa (MnP), endoglucanasa (EG) y endoxilanasa (EX) en suelo tratado con bioestimulación y bioaumentación de co-cultivo de Pycnoporus sanguineus LBM 023 y Pleurotus sajor caju LBM 105. Para eltratamiento de bioaumentación se mezcló suelo no estéril con 60% de humedad con P. sanguineus LBM 023, P. sajor-caju LBM 105 o el co-cultivo inmovilizados en bagazo de caña de azúcar (3:1). La mezcla de suelo con sustrato lignocelulósico no inoculado fue utilizada para el tratamiento de bioestimulación (3:1 p/p). Los controles consistieron en suelo con y sin PCBs. Las mezclas se incubaron en condiciones no estériles, a 24ºC por 60 días a humedad constante. Se tomaronmuestras destructivas los días 14, 42 y 60 de incubación de cada tratamiento por triplicado de las cuales se extrajo las enzimas con buffer fosfato de sodio pH 7. Del sobrenadante se determinaron las actividades enzimáticas Lac, MnP, EX y EG, y los perfiles enzimáticos y proteicos con ND-PAGE y SDS-PAGE respectivamente. Como resultado, se pudo observar el incremento significativo(p < 0,05) de la actividad Lac y EX en el co-cultivo al día 60 con respecto al suelo tratado con los monocultivos. El máximo nivel de la actividad MnP se registró al día 14 para los tratamientos de bioaumentación con los monocultivos y al día 60 para el co-cultivo. La actividad EG fue significativamente mayor para el monocultivo de P. sanguineus LBM 023 al día 14 con respecto alos otros tratamientos evaluados. Mediante el tratamiento de bioestimulación no se detectó ninguna de las enzimas estudiadas. Referido al perfil de secreción enzimática Lac, se puede observar que tanto el tratamiento con P. sanguineus LBM 023 como el co-cultivo presentaron dos bandas de actividad enzimática de distinto peso molecular todos los tiempos. En cambio, P. sajor caju LBM105 presentó una banda única de actividad los días 42 y 60. En el SDS-PAGE se observó un perfil proteico marcado por mayor cantidad e intensidad de bandas en el co-cultivo. Se concluye que el tratamiento de bioaumentación con co-cultivo presenta los valores más elevados de Lac, MnP y Xy. Tanto el perfil proteico como el de secreción de Lac se vió modificado en el co-cultivo en suelo contaminado con PCBs.