Búsqueda de vías que regulan envejecimiento dependientes del receptor nuclear daf-12 en Caenorhabditis elegans

ESTEBAN SALVATORE; ALFRED L. FISHER; DANIEL HOCHBAUM

Taller; II Taller de Biología Celular y del Desarrollo en Chascomús; 2014

El nematodo de vida libre Caenorhabditis elegans es un organismo modelo para el estudio del envejecimiento. Gusanos mutantes en genes como daf-2 (receptor de insulina) pueden vivir aproximadamente dos veces lo que viven gusanos wild type. El receptor nuclear daf-12, que muestra homología con los receptores de vitamina D y LXR está implicado en el desarrollo, el envejecimiento, y la formación de la larva dauer en condiciones ambientales adversas. A pesar de regular estas funciones en el ciclo de vida del gusano, la identidad de los genes blanco de daf-12 aún no se conocen. A partir de gusanos transgénicos que expresan daf-12 con un epítope TAP, hemos realizado inmunoprecipitación de la cromatina y posterior hibridización en chip (ChIP-chip). De este análisis, se encontraron 1175 regiones genómicas que se encuentran a 5 kb de 3.179 genes. Entre ellos, se encontraron genes blanco de daf-12 previamente descriptos, como lit-1 y los microRNA mir-48, -84, and -241, genes de respuesta a stress, genes daf (dauer formation) y genes del complejo mRISC. Dado que la formación de la larva dauer y longevidad de gusanos comparten vías de señalización, se utilizará una cepa mutante daf-2, que forma dauers a 25°C. Proponemos inhibir genes blanco de daf-12 mediante ARNi y determinar cuales de los genes son necesarios para la formación de dauers. La influencia en longevidad de estos genes será determinada en ensayos de sobrevida. Ensayos preliminares identificaron a fan-1 (reparación de ADN), F28B3.5 (canal de membrana), tag-340 (lipid transfer protein) y dhs-11 (deshidrogenasa) como posibles genes involucrados en la formación de la larva dauer.