VALORACIÓN DE ALTERACIONES EN EL ADN ESPERMÁTICO HUMANO MEDIANTE ELECTROFORESIS DE CÉLULAS AISLADAS

M. CELESTE ROBERT; ADRIANA CAILLE; SERGIO GHERSEVICH

Varadero

Congreso; XVIII Reunión Bienal de la Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana (ALIRH).; 2003

"VALORACIÓN DE ALTERACIONES EN EL ADN ESPERMÁTICO HUMANO MEDIANTE ELECTROFORESIS DE CÉLULAS AISLADAS" Robert C M; Caille A M; Ghersevich, S A Laboratorio de Estudios Reproductivos, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Argentina. Tanto la exposición de células a especies reactivas del oxígeno como a radiación ionizante podrían provocar oxidaciones de bases, roturas en la cadena, o formación de enlaces entre las bases del ADN. En el presente trabajo se evaluaron los efectos del estrés oxidativo inducido y la radiación ionizante sobre el ADN de espermatozoides humanos mediante una modificación del método de electroforesis de células aisladas en gel. Espermatozoides progresivos de muestras de donantes normozoospérmicos (OMS) recuperados mediante gradientes de densidad fueron tratados con concentraciones crecientes de H2O2 ó expuestos a radiación UV (durante 10, 30 y 60 min). Luego las células espermáticas fueron sometidas a electroforesis en condiciones alcalinas. El ADN espermático fue teñido por el método de plata y se evaluó la longitud total de migración del ADN celular para cada tratamiento. Los resultados se analizaron mediante el test ANOVA seguido por el test de Dunn. El ensayo permitió establecer un aumento significativo dosis-dependiente en la migración del ADN de espermatozoides tratados con H2O2 respecto de los controles (P < 0.001). El tratamiento con radiación UV resultó en una disminución significativa de la migración del ADN espermático respecto de los controles no expuestos (P < 0.001). A diferencia del tratamiento con H2O2, la radiación favorecería la formación de uniones cruzadas entre las bases nucleotídicas, resultando en una menor distancia de migración. La electroforesis de células aisladas sería un método sensible para evaluar daños estructurales en el ADN de espermatozoides humanos.