EVALUACION DE UNA VACUNA ALTERNATIVA CONTRA LA GRIPE. ?DISPLAY? EN LA SUPERFICIE DE BACULOVIRUS DE LA PORCION EXTRA-CITOPLASMATICA DE LA PROTEINA MATRIX 2 (M2e) PROTEGE CONTRA EL DESAFIO CON INFLUENZA

BOADO, LA; ALVAREZ, P; MATTION, N; TABOGA O

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Virología

EVALUACION DE UNA VACUNA ALTERNATIVA CONTRA LA GRIPE. ?DISPLAY? EN LA SUPERFICIE DE BACULOVIRUS DE LA PORCION EXTRA-CITOPLASMATICA DE LA PROTEINA MATRIX 2 (M2e) PROTEGE CONTRA EL DESAFIO CON INFLUENZA. LA Boado1, P Alvarez1, O Taboga2, N Mattion1 1 Centro de Virología Animal, ICT-Milstein, CONICET, Argentina. 2 Instituto de Biotecnología, CICVyA, INTA, Castelar, Argentina Introducción: La gripe es una de las enfermedades virales respiratorias agudas con mayor impacto sobre la población humana y la vacunación es el método más efectivo para prevenirla. Sin embargo, la falta de cobertura heterosubtípica de las vacunas en uso es un serio problema potencial para la sanidad humana. El surgimiento de una cepa de alta virulencia podría convertirse en un problema muy grave. Por esta razón, es de interés de nuestro laboratorio, la generación de una vacuna del tipo ?universal? contra la gripe. Es decir, una vacuna que genere una respuesta inmune ?cross-protectora? contra distintas cepas del virus. Hace años se identificaron a la nucleoproteína (NP) y a la proteína Matrix 2 (M2) como blancos principales de la inmunidad cruzada. Para el presente trabajo, se eligió como antígeno el péptido extra-citoplasmático de la proteína Matrix 2 (M2e), demostrado ya, que genera una respuesta inmune cross-protectora. Para vehiculizar este antígeno se utilizó el sistema baculovirus (Bv) exponiendo en las membranas de las partículas virales el péptido de interés. Este sistema de ?display? en superficie permitiría presentar este antígeno al sistema inmune de una manera similar a su presentación en una infección natural. Objetivo: Evaluar la capacidad protectora del ?display? en la superficie de Bv de una copia de M2e como fusión a la proteína gp64 (principal glicoproteína de membrana de Bv). Metodología: Para generar el sistema de ?display?, se clonó la secuencia codificante de M2e entre el péptido señal y la secuencia madura de la gp64 en el vector de transferencia, obteniendo así el vector pVLSUP1-M2e. Se obtuvieron Bvs recombinantes (rBv) por transfección de células de insecto Sf9 con el vector pVLSUP1-M2e y el reactivo BaculoGold?. También se generaron partículas de Bv wild type (Bv-wt) para ser utilizados como control. Se inocularon grupos de 3 a 5 ratones Balb/c con tres dosis cada 21 días con rBv formulados con y sin adyuvantes (se utilizaron hidróxido de aluminio o adyuvante de Freund completo). A los 21 días posteriores a la tercera dosis, los ratones se desafiaron con 5 DL50 de virus de influenza adaptado a ratón. Se tomaron registros diarios de peso para cada grupo. Resultados: El mayor índice de protección al desafío se obtuvo para el grupo de ratones vacunados con partículas de Bv que expresan en la membrana el péptido M2e sin adyuvante (protección del 60%). Cuando se formularon las partículas virales recombinantes, tanto con hidróxido de aluminio como con adyuvante de Freund, la protección fue de solamente un 20% de los animales desafiados. La inoculación con Bv-wt no presentó protección para ningún grupo. Conclusiones: El ensayo de desafío en animales inmunizados con las construcciones generadas demostró que es posible lograr protección contra influenza utilizando este sistema convirtiéndolo, de esta manera, en una alternativa interesante para el desarrollo de vacunas universales contra influenza.