Diferenciación fenotípica de cepas de Clostridium botulinum tipo A provenientes de casos de botulismo del lactante y de otros orígenes

SAGUA MD, LÚQUEZ C, BIANCO MI, BARZOLA CP, DE JONG LIT, FERNÁNDEZ RA.

Mendoza, Argentina

Jornada; IX Jornadas de Investigación de la Facultad de Ciencias Médicas, UNCuyo.; 2007

El botulismo del lactante (BL) es una toxiinfección producida por colonización intestinal de Clostridium botulinum (Cb) en menores de un año y producción in situ de neurotoxina botulínica (NTBo). Actualmente, es la forma epidemiológica más importante del botulismo humano debido al elevado número de casos y a la dificultad en el diagnóstico diferencial con otras enfermedades neurológicas. Es causada por colonización intestinal de clostridios productores de NTBo, principalmente Clostridium botulinum (Cb). Esta especie involucra un conjunto heterogéneo de cepas agrupadas por su capacidad de sintetizar NTBo. Éstas son producidas en durante la fase logarítmica y liberadas posteriormente al medio formando complejos con proteínas no tóxicas. Las NTBo tipo A, B, C, D y G pueden incluir hemaglutininas (HA) en dichos complejos. El objetivo de este trabajo fue investigar características fenotípicas que permitan diferenciar cepas de Cb de diferentes orígenes. Para ello se estudiaron 40 cepas de distintos orígenes (suelo, 9; BL, 13; botulismo alimentario, 5; polvo ambiental, 5, de colección, 2 y de referencia, 6), las cuales se sometieron a pruebas bioquímicas y determinación de antibiotipo para ampicilina, amoxicilina, clindamicina y metronidazol por Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) en medio sólido (normas de NCCLS). Las NTBo sintetizadas por las mismas se caracterizaron por serología (prueba de neutralización con antitoxinas mono y polivalentes), test de hemaglutinación (presencia y título de HA) y unión a receptores celulares gangliósidos (cromatografía en capa delgada e inmunotinción). Se observó homolología en las propiedades bioquímicas de cepas de Cb de diferentes orígenes. La CIM para betalactámicos estuvo comprendida entre 0,06 y 2 µg/ml y para clindamicina y metronidazol, entre 0,25 y 64 µg/ml. Sólo tres cepas produjeron NTBo HA+ con títulos de 4 (D-Africa) y 128 (A-Hall,y C-London), respectivamente. Cada serotipo evidenció diferentes perfiles de unión a gangliósidos, aunque en algunos casos, también se observaron diferencias dentro de un mismo serotipo (B-WH y B-M612; A-BL10 y A-M110). Las NTBo/A HA+ no se unieron a estos receptores pero sí a glicolípidos carentes de ácido siálico. Las propiedades bioquímicas así como la presencia de HA y los patrones de sensibilidad a antimicrobianos no representarían diferencias significativas para caracterizar cepas de Cb aisladas de casos de BL. Sin embargo, los perfiles de unión a gangliósidos podrían usarse para tal fin, aunque debe profundizarse su estudio para explicar las diferencias encontradas dentro de un mismo serotipo. Las mismas podrían deberse a la presencia de otro(s) factor(es) que intervengan en dicha unión.