ESTUDIO PRELIMINAR DEL EFECTO DE LA RADIACIÓN UV-B SOBRE COTILEDONES DE GIRASOL

COSTA, HERNÁN; TOMARO, MARÍA L.

San Luis, Argentina

Congreso; II Congreso Nacional de Estudiantes de Bioquímica y II Encuentro Nacional de Estudiantes de Biotecnología; 2001

Facultad de Química Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional de San Luis

El ozono constituye la principal barrera para la radiación ultravioleta (UV) en el planeta y una reducción de su nivel en la atmósfera resulta en un flujo aumentado de UV sobre la superficie terrestre. Se la puede clasificar en tres categorías: UV-C (180-280 nm), UV-B (280-320 nm) y UV-A (320-400 nm). UV-B inhibe procesos fundamentales en vegetales, como la fotosíntesis y el crecimiento. La radiación UV ha sido asociada con la producción de especies tóxicas del oxígeno (ROS). Las plantas han desarrollado un complejo e integrado sistema de defensa antioxidante, que incluye enzimas y metabolitos de bajo peso molecular. Dentro de las primeras se destacan las superóxido dismutasas (SODs), que catalizan la dismutación de O2- a H2O2 y O2; catalasa (CAT), ascorbato peroxidasa y otras peroxidasas que catalizan la reducción del H2O2 a H2O. Los metabolitos incluyen al glutatión, ácido ascórbico, tocoferoles, poliaminas y flavonoides. La susceptibilidad al daño oxidativo depende del balance general entre factores que incrementen la generación de ROS y de aquellos componentes celulares con acción antioxidante. Los objetivos de este trabajo fueron: determinar el estrés oxidativo producido como consecuencia de la radiación UV-B sobre cotiledones de girasol y evaluar la capacidad de respuesta de las plantas a dicho estrés. Hemos irradiado cotiledones de girasol de 4 días de desarrollo con dosis de exposición similares a las presentes en las áreas de cultivo de nuestro país. Los marcadores de estrés oxidativo estudiados hasta el momento fueron: contenido de clorofila y daño a proteínas. También se determinó la actividad enzimática de SOD y CAT, y el contenido de glutatión. Para tiempos de 50 y 100 min de irradiación, la degradación de clorofila fue de 12% y 16%, respectivamente. No se observó incremento de grupos carbonilos en la determinación de daño a proteínas. La actividad específica de SOD disminuyó en forma significativa luego de la irradiación con UV-B, mientras que la de CAT aumentó significativamente para ambas dosis de irradiación. El contenido de glutatión total sufrió un incremento de 11 y 5 veces para ambos tiempos de exposición, respectivamente. Conclusiones: la degradación de clorofila indica la presencia de estrés oxidativo causado por el UV-B. Sin embargo, no se ha detectado oxidación de proteínas por los métodos utilizados, lo que indica que el daño oxidativo es leve. La modificación del contenido de glutatión total permite evidenciar su sensibilidad frente al UV-B. La futura determinación de la relación entre glutatión reducido y oxidado nos permitirá disponer de una herramienta adicional para evaluar la magnitud del daño y la capacidad de respuesta de la planta. Si bien los datos obtenidos para SOD no demuestran la importancia de la misma en el mecanismo de detoxificación, la actividad aumentada de CAT indicaría una segunda línea de defensa contra el daño oxidativo.