INVESTIGADORES
OMARINI Alejandra Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de un extracto de paja de cereal en la expresión de 12 genes codificantes de lacasa en cultivos líquidos de Pleurotus ostreatus
Autor/es:
CASTANERA, RAUL; PEREZ, GÚMER; OMARINI, ALEJANDRA; RAMIREZ, LUCIA; PISABARRO, GERARDO
Lugar:
Salamanca
Reunión:
Congreso; XXIII Congreso Nacional de Microbiología; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Española de Microbiología
Resumen:
La lignocelulosa es el componente principal de la pared celular de las plantas y constituye la mayor fuente de carbono renovable en el planeta. El principal inconveniente de su uso como biomasa vegetal es el carácter recalcitrante a la degradación de la lignina. El hongo basidiomiceto P. ostreatus secreta de forma natural un complejo de enzimas capaces de degradar eficientemente éste polímero. Entre estas enzimas se encuentran las lacasas (E.C. 1.10.3.2), glicoproteínas con un peso molecular de entre 60 y 80 kDa que catalizan la peroxidación de un amplio rango de sustratos aromáticos y fenólicos. Con el objetivo de aumentar la producción de estas enzimas en fermentadores industriales es importante encontrar sustancias inductoras de bajo coste. En éste estudio se ha evaluado el efecto de un inductor compuesto por la fracción hidrosoluble de la paja de trigo en la expresión de los genes Lacc y en la producción de lacasa extracelular. Para ello se utilizaron 5 cepas de P. ostreatus var. florida con diferencias en ploidia, velocidad de crecimiento y actividad enzimática. Las cepas se cultivaron en medio líquido basal (M7G) y el inductor se añadió una vez alcanzaron la fase estacionaria de crecimiento. Tras 24 h de incubación se cuantificaron los niveles de expresión génica de los 12 genes Lacc mediante RT-qPCR, se midió la cantidad de lacasa extracelular y se realizaron geles SDS-PAGE con las fracciones enzimáticas extra e intracelular. Se utilizó la tecnología SYBR green, y los niveles de expresión se calcularon en base al método corregido con la eficiencia de amplificación (1). Los resultados permitieron identificar dos genes que mantuvieron una expresión constante tras la inducción en todas las cepas (Lacc3, Lacc12, p
