El péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrP) estimula la proliferación en células de adenocarcinoma de colon humano a través de las vías de señalización ERK 1/2, p38 MAPK y PI3K/AKT

MARTÍN, MA. JULIA; CALVO, NATALIA G; WIES MANCINI, VICTORIA; RUSSO DE BOLAND, ANA; GENTILI, CLAUDIA R

Capital Federal

Congreso; XXX Reunión Anual AAOMM; 2013

El análogo tumoral de la hormona paratiroidea (PTHrP) está presente en el feto, en la mayoría de los tejidos adultos y en diversos tumores. Su expresión se correlaciona con la gravedad del carcinoma de colon y en ciertas líneas celulares intestinales su sobreexpresión aumenta la proliferación celular. Previamente demostramos que el tratamiento con PTHrP exógeno (10-8 M) estimula la proliferación en la línea celular Caco-2 derivada de adenocarcinoma de colon humano a través de la activación de la vía ERK 1/2 MAPK. En el presente trabajo se investigó si PTHrP además activa en estas células intestinales otras MAPKs y la vía de señalización de PI3K/Akt (o PKB) que median respuestas celulares como proliferación y supervivencia celular. Los resultados obtenidos por Western Blot revelaron un incremento en la activación de p38 MAPK y de Akt luego del tratamiento por 10-60 min con PTHrP. El aumento de la fosforilación de ERK1/2 inducida por el péptido fue revertido por LY 294002, un inhibidor de PI3K, sugiriendo que la vía PI3K/Akt participa en la activación de esta quinasa. Las imágenes obtenidas por microscopia de fluorescencia revelaron que la hormona induce cambios en la distribución subcelular de p38 y Akt favoreciendo la ubicación nuclear de ambas enzimas. Se observó además que los factores de transcripción CREB y ATF-1, que regulan genes involucrados en la proliferación celular, son fosforilados/activados por PTHrP, siendo el aumento en la fosforilación de ambos factores bifásico, con una fase temprana (10-15 min) y una segunda fase alcanzando valores significativos a la hora de tratamiento. Este efecto fué abolido por los inhibidores de ERK (PD98059) y p38 MAPK (SB203580), sugiriendo que ambas MAPKs están involucradas en la modulación por PTHrP de la fosforilación de CREB y ATF-1. Finalmente, comprobamos que la proliferación de estas células inducida por el péptido es suprimida por los inhibidores PD 98059, SB 203580 o LY 294002. En conjunto, nuestros resultados indican que PTHrP exógeno estimula la proliferación de las células Caco-2 y revelan, que las vías de señalización ERK1/2, p38 MAPK y PI3K/Akt están involucradas en el efecto mitogénico de PTHrP en estas células intestinales.