La Insulina Promueve la Activación de Oxido Nítrico Sintasa Mitocondrial vía AKT en Músculo Esquelético de rata

FINOCCHIETTO PV; BARREYRO F; PODEROSO JJ

Ciudad de Mar del Plata

Congreso; XLIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC). 2004; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Cambios postraduccionales relativamente específicos como acilación en N-terminal y fosforilación en Ser 1412 contribuyen a la traslocación de óxido nítrico sintasa neuronal (nNOSa) a mitocondrias ae diferentes tejidos de rata (mtNOS). En las organeias. mtNOS sintetiza óxido nítrico (NO) dirigido vectorialmeníe a la matriz; de acuerdo con la concentración de NO en el estado estacionario, se modulan la velocidad de transferencia de electrones, el estado de reducción de los componentes de la cadena respiratoria, la producción de especies activas del oxígeno y la captación de O2. Considerando que Ser1412 integra un oominío dependiente de Akt y ios efectos de insulina en ¡a activación de esta quinasa, el objetivo del presente trabajo es relacionar efectos de insulina y actividad de mtNOS en el músculo esquelético. Con ese propósito, ratas Wistar (~ 200- 25C¿- ',%••-' -. = ::a;as co.-i 0,1 U/Kg peso de insulina glargina o CiNa 0.9co S-C. y se extrajeron los músculos sóleus, extensoris aigitorum. etc. a ias 3 y 48 hs: la hipoglucemia fue evitada a través oe administración de sacarosa ( 5% en agua de bebida). Las mitocondrias fueron aisladas por centrifugación diferencial y la actividad de mtNOS se determinó con H3-L-Arg y su expresión y a de fosfo-Akt por westem blot con anticuerpos monoconales. Los resultados demostraron que insulina aumenta la actividad de miNOS ! C: 30.43pmoles/ min/ mg prot vs 48hs: 145.8 pmoles/ min/ mg prot) ( p<0.05) a las 48 hs sin cambios en su expresión, a las 3 hs no hay cambios en ia expresión ni en ¡a actividad y que ia expresión de fosfo-Akt aumentó en mitocondria (38.8%) y citosol (59.7%: ambos p<0.05) a las 3 hs. Se concluye que Akt consecutivo a activación de PI3K por insulina puede traslocar a mitocondria y aumentar la actividad de mtNOS probablemente por fosforilación en Ser 1412. Este efecto reduce la utilización de equivalentes de reducción y facilita la actividad de vías metabólicas biosintéticas como ia j.ücógenosíntesis