POTENCIALIDAD BIOTECNOLÓGICA DE LA MULTIPLICACIÒN DE HONGOS MICORRÌCICOS EN SISTEMA AUTOTRÒFICO DE BAJO COSTO

COMMATTEO JAQCUELINE GISELLE; BARBIERI, PABLO ANDRÉS; COVACEVICH, FERNANDA

Buenos Aires

Congreso; XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo; 2022

AACS

La potencialidad de los Hongos Micorrícicos Arbusculares (HMA) en favorecer la nutrición y/o crecimiento de plantas hospedadoras, en biocontrolar patógenos del sistema radical, y en favorecer la microbiota y estructura del suelo, es indiscutible. Sin embargo, su multiplicación presenta más complejidades que la de otros microorganismos PGPM (de las siglas en inglés Plant Growth Promoting Microorganisms), En parte la naturaleza biotrófica obligada de los HMA, el crecimiento más lento que otros PGPM, y la coexistencia con bacterias endosimbiontes, son aspectos que condicionan la multiplicación de los inóculos. Por ello, en general, los productos de calidad en el mercado son a base de sustratos sólidos, donde la simbiosis micorrícica seha desarrollado (mezcla de raíces colonizadas, esporas, micelio, suelo). Sin embargo, esto afecta la logística de la aplicación con fines productivos. Nuestro objetivo fue definir una logística de multiplicación de HMA libre de sustrato sólido y de bajo costo que, en el mediano plazo, pueda escalarse con fines biotecnológicos. Para ello se consideraron 4 aspectos fundamentales según se detalla: i) Planta trampa: se seleccionaron especies micotróficas de importancia agrícola (maíz, soja, sorgo y alfalfa); ii) Medio de cultivo con pH controlado y suministro de suplemento nutricional; para lo que se evaluó 1) medios semisólidos: agar agua (AA) y carboximetilcelulosa (CMC) al 1%; 2) medios semilíquidos: AA y CMC al 0.1%; y 3) medio líquido: agua destilada (H2Od) con sistema de aireación; iii) Forma de multiplicación: sistema autotrófico (dos compartimentos: aéreo y radical) iv) Inóculos de HMA: conformados por esporas de elevada representatividad con superficieexterna parcialmente esterilizada. Las esporas fueron extraídas por tamizado en húmedo y centrifugación en gradiente de sacarosa al 60% de un ensayo de larga duración con sistemas de rotación de cultivos (maíz-trigo-soja), ubicado en la E.E.A-INTA, Balcarce. Se seleccionaron los morfotipos más representativos (gigasporoide, glomoide y acaulosporoide) que fueron parcialmente esterilizados externamente a través de sonicado y lavados con antibióticos. La inoculación se realizó en proximidades de las raicillas de plántulas pregerminadas axénicamente. Se monitoreó el crecimiento de las plantas, posibles indicadores de deficiencias de nutrientesy/o contaminación, proliferación de micelio o esporas y colonización micorrícica. A los 60 días después de la inoculación se detectó abundante micelio externo en todos los sistemas. Sin embargo, en medios como el CMC 1%, AA 1% y/o H2Od la abundante contaminación por otra microbiota (tanto fúngica como bacteriana) condicionó el monitoreo de la multiplicación de los HMA. Además de micelio externo, se detectaron indicios incipientes de colonización micorrícica en plantas de maíz y sorgo crecidas con medio AA 0.1%. El secuenciamiento de una parte de la región ribosomal mayor LSU rDNA del micelio externo (previa extracción de DNA y amplificación por reacción de PCR utilizando cebadores específicos para especies glomoides de HMA) permitió determinar que el mismo presenta alta similitud (identidad >95%) con representantes de losgéneros Glomus y Rhizophagus. Futuros estudios deberán confirmar la presencia de otros géneros de HMA en el sistema planteado. Asimismo, el paso siguiente es evaluar posibles etapas de escalado del proceso.