Exploración de la actividad antifúngica fotosensibilizante de especies vegetales de la tribu Helenieae

POSTIGO, AGUSTINA; ACERBI HERNÁNDEZ, VIRGINIA; BIAZZI, MARÍA DELIA; BUTASSI, ESTEFANÍA; SVETAZ, LAURA; ZACCHINO, SUSANA; PETENATTI, ELISA; SORTINO, MAXIMILIANO

Rosario

Jornada; IX Jornada de Ciencia y Tecnología; 2015

Universidad Nacional de Rosario

La tribu Helenieae es un taxón con gran plasticidad genética y capacidad adaptativa dentro de la familia Asteraceae, la familia vegetal con mayor diversidad a nivel mundial. En Argentina, las Helenieae están representadas por 12 géneros, incluyendo 38 especies y 3 variedades. Debido a su alto grado de endemismo (42%), las especies de la tribu Helenieae son una importante fuente natural para la búsqueda de nuevos principios activos. Algunos estudios previos llevados a cabo sobre entidades de esta tribu han demostrado una interesante bioactividad como antifúngicos y antibacterianos y particularmente, algunas especies han demostrado poseer actividad antifúngica únicamente al ser excitadas por luz de una determinada longitud de onda. Esta actividad es debida a la presencia de moléculas fotosensibilizantes que la planta genera como protección frente a patógenos y predadores. La Quimioterapia Fotodinámica Antimicrobiana (QFA) es una alternativa terapéutica para el tratamiento de infecciones fúngicas que utiliza moléculas fotosensibilizantes y luz para inducir un daño oxidativo en patógenos microbianos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad antifúngica fotosensibilizante de extractos vegetales de plantas pertenecientes a la tribu Helenieae endémicas de Argentina. Se realizaron extractos, utilizando un aparato de extracción Soxhlet de: Helenium argentinum Ariza, Porophyllum ruderale (Jacq.) Cass, Schkuhria pinnata (Lam.), Tagetes minuta L. y Thymophylla pentachaeta (DC). La actividad se evaluó por el método M27-A3 de CLSI frente a Candida albicans ATCC 10231. Se utilizaron microplacas de 96 pocillos en las que se realizaron diluciones sucesivas al medio de los extractos a los que posteriormente se incorporaron inóculos de los microorganismos a una concentración de 5x103 UFC/mL. La metodología fue modificada para detectar actividad antifúngica fotosensibilizante, realizándose en paralelo en dos microplacas, una de las cuales se irradió durante 1 h con luz UV-A (350-410 nm), mientras que la otra, permaneció en oscuridad. Posteriormente, se realizaron recuentos tomando alícuotas de cada pocillo de las microplacas, las cuales se sembraron en placas de agar-Sabouraud Glucosa, se incubaron a 28 ºC por 48 h y se determinaron las UFC/mL. Para cada combinación extracto/hongo, se determinó la Concentración Fungicida Mínima (CFM), mínima concentración del extracto que producía la muerte de la totalidad de los microrganismos. Los resultados mostraron que ninguno de los extractos evaluados poseía actividad antifúngica en oscuridad. Sin embargo, cuando fueron sometidos a irradiación se observó actividad antifúngica con los extractos de P. ruderale (hexano: CFM= 31,25 µg/mL y diclorometano: CFM= 125 µg/mL), T. minuta (hexano: CFM= 62,5 µg/mL y diclorometano: CFM= 62,5 µg/mL) y T. pentachaeta (acetato de etilo: CFM= 62,5 µg/mL). Estos datos proporcionan evidencia de que los extractos de P. ruderale, T. minuta y T. pentachaeta podrían constituir una alternativa interesante para los tratamientos de candidiasis utilizando QFA. Futuros trabajos se encaminarán hacia el aislamiento y elucidación estructural de los metabolitos responsables de la actividad observada.