Síntesis y actividad antifúngica de derivados metilados del ácido nordihidroguayarético

BUTASSI, ESTEFANÍA; SANCHEZ, MARIANELA; PALERMO, JORGE; RAIMONDI, MARCELA; DI LIBERTO, MELINA; SVETAZ, LAURA; ZACCHINO, SUSANA

Mar del Plata

Simposio; XX Simposio Nacional de Química Orgánica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

El ácido nordihidroguaiarético (NDGA) es un lignano de origen vegetal, a partir del cual es posible sintetizar nueve derivados metilados diferentes, dos monometilados, cuatro dimetilados, dos trimetilados y un tetrametilado. Uno de los compuestos monometilados ha sido aislado previamente de L. nitida Cav. (Zygophyllaceae), mostrando buena actividad antifúngica, superior a la de NDGA contra Candida albicans ATCCC 10231 (Ca) y Cryptococcus neoformans ATCC 32264 (Cn).1 Además, tres de los cuatro dimetilados y los dos trimetilados fueron aislados de L. tridentata Cav. aunque no se informó su actividad antifúngica.2,3 Con el fin de estudiar la influencia del grado de metilación de estos lignanos en la actividad antifúngica, decidimos sintetizarlos y evaluarlos frente a Ca y Cn mediante bioautografía.Para obtener los compuestos con diversos grados de metilación, tratamos a NDGA (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) con cantidades variables (0,5-4 equiv.) de Me2SO4 y de K2CO3 a 56 ºC, obteniendo como producto, cinco mezclas diferentes (entradas I-V).4Cada entrada se analizó mediante LC-MS/MS y se evaluó la presencia de los diferentes derivados metilados. Se pudo observar que las entradas I-III presentaron principalmente monometilados, la entrada IV di-, tri- y tetrametilados, mientras que la entrada V presentó como compuesto mayoritario el derivado tetrametilado. Se intentó purificar cada uno de los nueve derivados metilados mediante HPLC preparativo. Debido a su gran similitud estructural, solo se logró separar a los compuestos por su grado de metilación, es decir, se separaron los cuatro grupos de compuestos (mono-, di-, tri- y tetrametilados). Para la bioautografía, se sembraron en placas de Sílica-gel GF 254 cada una de las muestras (80 µg) y los testigos NDGA y tetrametilado (50 µg). La placa se desarrolló con DCM:MeOH (95:5). Se vertió sobre las placas una mezcla de medio Agar-Sabouraud con 0,02% de rojo fenol (1 mL/cm2) y un inóculo de Ca y de Cn de 5 x 104 UFC/mL. Después de la incubación, las placas se revelaron con cloruro de metiltiazoliltetrazolio (MTT).El NDGA y los derivados monometilados mostraron actividad contra Ca y Cn, mientras que los dimetilados resultaron activos sólo contra Cn. Los derivados tri- y tetrametilados no mostraron actividad antifúngica contra las cepas evaluadas.