Nuevos biomarcadores en la Enfermedad de Chagas: un enfoque proteómico

GULIN, JEN; BROSSAS, JY; GARCÍA BOURNISSEN, F; MAZIER, D; ALTCHEH, J

Misiones

Encuentro; 17° Encuentro Nacional de Investigación Pediátrica; 2015

Sociedad Argentina de Pediatría

La Enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, representa un grave problema de salud pública. El criterio de cura es la negativización de anticuerpos anti T. cruzi, medidos por serología convencional. Esto requiere largos tiempos de seguimiento postratamiento. Se ha propuesto PCR en tiempo real para detectar fallas terapéuticas pero aún no está validada para evaluar eficacia terapéutica. La búsqueda de nuevos marcadores de respuesta terapéutica es esencial para la evaluación de nuevas drogas parasiticidas.El objetivo de este proyecto es identificar proteínas y péptidos de bajo peso molecular candidatas para el seguimiento de pacientes con Enfermedad de Chagas empleando herramientas de análisis proteómico.Utilizando modelos de infección in vitro e in vivo se establecerá una lista de proteínas presentes durante la infección y no detectables luego del tratamiento parasiticida. Las proteínas identificadas serán validadas en sujetos tratadosPoblación: Criterio de inclusión: niños menores de 18 años infectados con T. cruzi. Consentimiento y asentimiento informado firmado. Criterio de exclusión: niños previamente tratados con drogas parasiticidas, niños con enfermedades hepática, renal o historia de inmunodeficiencia. Se incluirá un grupo control de niños no infectados. Tratamiento: Benznidazol 5-8 mg/kg/días, durante 60 días, con seguimiento a los 7, 30 y 60 días luego de comenzado el tratamiento y 3 y 9 meses después de finalizado. En cada visita se tomarán muestras para realizar serología convencional, PCR y ensayos de proteómica.Para los ensayos de proteómica se realizará depleción de proteínas mayoritarias y enriquecimiento por péptidos-ligandos. Luego se evaluarán diversos enfoques de identificación de proteínas mediante espectrometría de masa MALDI-TOF y cromatografía líquida MS/MS. Los resultados serán analizados utilizando software específicos y las proteínas identificadas serán utilizadas para el análisis de los sueros de pacientes.El estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital de Niños ?Dr. Ricardo Gutiérrez?.Financiamiento: Programa de Cooperación Científico-Tecnológica MINCyT, Argentina y ECOS-Sud, Francia.