Regulación de la localización subcelular y la actividad transcripcional de GR por las proteínas TPR 14-3-3sigma Y PP5

GISELA MAZAIRA; MARTÍN MONTE; ALEJANDRA ERLEJMAN; MARIO GALIGNIANA

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

GR forma complejos con hsp90, hsp70, p23 y una proteína TPR. Según la secuencia y la orientación espacial de sus α-hélices antiparalelas de dominios de 34 aa, algunas proteínas TPR se unen a hsp90. Es así como CyP40, PP5, FKBP51 y FKBP52 se asocian a receptores esteroidales. En trabajos previos demostramos que la unión de hormona favorece el recambio de FKBP51 por FKBP52, la que a diferencia de FKBP51, favorece el retrotransporte de GR y su actividad transcripcional. Se ha reportado que 14-3-3σ retiene a GR en el citoplasma e inhibe su actividad transcripcional. Estudios cristalográficos muestran que 3 de las 9 α-hélices de 14-3-3 superponen su geometría con la de los dominios TPR de PP5. Aquí evaluamos la posible redundancia funcional sobre GR de ambas proteínas. La inmunoprecipitación de GR coadsorbe a hsp90, FKBP52 y PP5, pero también a 14-3-3σ. En ausencia de esteroide, GFP-GR se excluye del núcleo en proporción significativamente mayor (P≤0,05) que en células normales (31,5±4,2%) al sobreexpresar a 14-3-3σ (20.2±3,1%) o al dominio TPR de PP5 (11,3±2,7%), siendo la velocidad de importación de GR menor (t0,5 = 4’, 8’ y12’ respectivamente) . En contraste, la sobreexpresión de PP5 muestra una mayor proporción de GR nuclear (50,7±4,6%) y mayor enlentecimiento del tránsito (t0,5 =22’). La velocidad de exportación nuclear también se enlentece, siendo los t0,5 de 13,5 h (control), 4 h (14-3-3), 3,5 h (PP5) y 2 h (TPR). Mientras que TPR inhibe la actividad transcripcional, PP5 y 14-3-3 muestran un perfil bifásico (activación seguida de pérdida de activación o de franca inhibición para el caso de 14-3-3). En resumen, si bien 14-3-3 y PP5 poseen dominios TPR similares y efectos transcripcionales equivalentes, sus acción sobre el transporte de GR es opuesta (14-3-3 favorece la retención citoplasmática y PP5 la nuclear). El dominio TPR aislado es siempre inhibitorio (transcripción y transporte) debido a su eficiencia para en competir con cualquier otro factor TPR.