Utilización de coenzima Q0 como pseudo-templado en el desarrollo de un polímero de impresión molecular para el reconocimiento selectivo de coenzima Q10

CONTIN M; FLOR. S.; MARTINEFSKI M; SAMASSA, P; LUCANGIOLI S.; TRIPODI V.

Congreso; 7mo Congreso de Química Analítica; 2013

En este trabajo, se desarrollo  un nuevo polímero de impresión molecular (MIP) utilizado como sorbente en extracción en fase solida para la determinación de coenzima Q10 (CoQ10) en extracto de hígado. CoQ10 es un cofactor esencial en la fosforilación oxidativa mitocondrial y un poderoso agente antioxidante que se encuentra en bajas concentraciones en muestras biológicas. Este hecho y su alta hidrofobicidad hacen que el análisis de CoQ10 sea técnicamente difícil. En consecuencia, un MIP se sintetizó usando coenzima Q0 (CoQ0) como templado, ácido metacrílico (MAA) como monómero funcional, acetonitrilo como porógeno, etilenglicol dimetacrilato (EDMA) como agente entrecruzante y peróxido de benzoilo como iniciador. La utilización de un templado (CoQ0), diferente a la molécula a analizar (CoQ10), posee la ventaja de eludir las hipotéticas perdidas de CoQ10 (en caso de ser utilizado como templado), proveniente de trazas remanentes aun después de un exhaustivo lavado, que podrían interferir en la cuantificación de la misma  Se evaluaron varios parámetros que afectan a la preparación del polímero (relación templado monómero) y la eficiencia de la extracción (solvente, cantidad de polímero, y tiempo de interaccion) . Se realizó la caracterización morfológica de MIP y NIP (polímero no impreso) mediante microscopia de barrido, isoterma de adsorción de nitrógeno, para determinar su superficie. Se realizó la comparación adecuada con C18 como adsorbente de extracción en fase sólida, obteniéndose un factor de purificación en MIP tres veces mayor en relación con C18.   Las condiciones óptimas para la extracción en fase sólida por impresión molecular (MISPE) consistieron en 400 µl de, una etapa de lavado y la elución con 1-propanol.La CoQ10 en las muestras se analizó por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). Los análisis de  recuperaciones  fueron superiores a 73,7%, con una buena precisión (3.6 a 8.3%); límite de detección y cuantificación de 2,4 y 7,5 μg.g-1, respectivamente y el rango lineal entre 7,5 y 150 μg.g-1 de tejido. El nuevo procedimiento MISPE proporciona una exitosa limpieza para la determinación de CoQ10 en una matriz compleja.