Clonado del gen de una hemolisina de Vibrio cholerae no O1 codificado en un plásmido

BIDINOST C; CORTES P; SAKA A; BOCCO JL

Vina del Mar, República de Chile

Congreso; Reunión Iberoamericana de Bioquímica, Biología Molecular y Biología Celular; 2000

Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular de Chile - Sociedad de Biología Celular de Chile - Sociedad Argnetina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular-Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular

Vibrio cholerae no-O1 es una bacteria capaz de producir un cuadro clínico de gastroenteritis indistinguible del cólera. Si bien los factores de virulencia de estas cepas no productoras de toxina colérica aún no han sido dilucidados, se han descripto diferentes toxinas como posibles elementos de patogenicidad. Dada la gran variabilidad genética de esta bacteria, los aislamientos en diferentes lugares geográficos podrían tener importantes variaciones en sus factores de virulencia. En nuestro laboratorio estamos estudiando cepas de V. cholerae no O1 aisladas de pacientes de la ciudad de Córdoba, Argentina. Estas cepas son portadoras de un plásmido de 6 Kbp con número de copias intermedio, no replicativo en E. coli y no descripto hasta el momento. El clonado del plásmido demostró la presencia de un gen que codifica una hemolisina, detectable en E. coli por halo de lisis en agar sangre, pero no en ensayos de hemólisis en tubo. Sin embargo, el análisis electroforético de las proteínas secretadas por el clon en E. coli permitió la detección de un polipéptido diferencial de aprox. 70 KDa, presente en V. cholerae no O1 en similar intensidad. Estos resultados indicarían que el producto secretado en E. coli  tiene menor actividad que el correspondiente de V. cholerae. El tamaño molecular encontrado se encuentra dentro del rango descripto para otras hemolisinas de V. cholerae. La secuencia del gen permitirá conocer la identidad de este probable factor de patogenicidad. La presencia del mismo en un plásmido de V. cholerae aún no descripto podría indicar un proceso de transferencia horizontal de genes de virulencia entre diferentes cepas de V. cholerae.