La actividad de la vía alternativa de NFkB en el Linfoma de Hodgkin refractario y recaído.

GAMBOA-CEDEÑO, ANGÉLICA; CASTILLO, MARIÁNGELES; OTERO, VICTORIA; SCHUTZ, NATALIA; FANTL, DOROTEA; CUGLIARI, SILVANA; MARTA E. ZERGA; GARCÍA RIVELLO, HERNÁN; JAUK VITALI, FEDERICO; ERICA A. ROJAS BILBAO; NUÑEZ, MYRIAM; RANUNCOLO, STELLA MARIS

CABA

Jornada; XXXIII Jornadas Multidisciplinarias del Instituto de Oncología ?Ángel H. Roffo?; 2018

Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"

La enfermedad refractaria y recaída representa hoy un gran desafío en el tratamiento de pacientes con Linfoma de Hodgkin (LH). No existe en estos casos una terapia específica sino la aplicación de distintas combinaciones de drogas citotóxicas que se asocia con alto riesgo de toxicidad. Solo el 50% de los pacientes refractarios o recaídos responde a estos tratamientos de rescate. Esta situación señala la necesidad de comprender mejor la biología molecular de este linfoma y la necesidad de identificar blancos moleculares de terapias dirigidas. Previamente reportamos que el LH requiere del brazo alternativo de NFkB, mediado por Rel-B y NIK, para sobrevivir. Su señalización constitutiva parece estar involucrada en la enfermedad refractaria y en la recaída.Nos propusimos determinar los genes blanco de esta vía de NFkB en LH. Desarrollamos ChIP-Seq en la línea celular humana de LH U-H01 para Rel-A, Rel-B, cRel, p50 y p52. Se analizaron los picos ubicados a una distancia igual a +/- 2kb desde el sitio de inicio de la transcripción. En el caso de Rel-B los picos se encontraron distribuidos sobre 4.509 genes, para cRel sobre 1.994 genes y para Rel-A sobre 830. Hubo solo una superposición del 6% y del 11% entre sitios de unión al ADN de Rel-B con Rel-A y cRel respectivamente. Los resultados de ChiP-Seq se fusionaron con los obtenidos en arrays de expresión, en los cuales se compararon las células U-H01 traducidas con un retrovirus portador de un shRNA inducible para knockear la expresión de Rel-B vs células U-H01 infectadas con el retrovirus pero sin inducción de la expresión del shRNA. Se consideraron como significativos aquellos genes cuya expresión se encontró más de dos veces aumentada o disminuida y que presentaron un p˂0.001.Uno de los genes exclusivamente controlado por Rel-B fue BCL2. Demostramos que la expresión exógena de BCL2 fue capaz de rescatar parcialmente a las células de LH de la muerte inducida por la depleción de Rel-B. También encontramos que BCL2 es útil como marcador de pronóstico en términos de sobrevida global en una cohorte de 96 pacientes con LH [Log Rank Test (p=0.002)].Rel-B, entre los factores de transcripción de la familia NFkB, juega un rol importante en la enfermedad refractaria y recaída, siendo BCL2 uno de sus principales genes blanco. Consideramos que BCL2 se presenta como un candidato interesante para una terapia blanco-dirigida en el subgrupo de pacientes con LH que exhiben activación constitutiva del brazo alternativo de NFkB.