Análisis de subpoblaciones de células dendríticas presentes en el microambiente tumoral de carcinomas mamarios humanos

GARCÍA SAMARTINO, CLARA; VAQUER, CINTIA CELINA; MILITELLO, RODRIGO; SANTONI, DIEGO; SARRIO, LEANDRO; CEBRIÁN, IGNACIO; CAMPOY, EMANUEL MARTÍN

Mendoza

Congreso; 1º Congreso Provincial Interuniversitario de I+D+I; 2021

Red Interuniversitaria I+D+I

Argentina tiene la segunda tasa más alta de América del Sur de mortalidad por cáncer de mama. Dada la morbimortalidad que representa el cáncer de mama, es de vital importancia comprender correctamente los mecanismos involucrados en el desarrollo de esta patología para poder plantear nuevas estrategias traslacionales que brinden tratamientos más eficientes que los actuales. El microambiente tumoral (MAT) es el entorno celular en el que se desarrolla el tumor. Además de las células tumorales, el MAT incluye vasos sanguíneos circundantes, matriz extracelular, células estromales, fibroblastos asociados a tumores, células del sistema inmune y también moléculas de señalización. Las células inmunes presentes en el MAT realizan una doble función, pudiendo eliminar o favorecer la malignidad según las señales presentes. Dentro de las células del sistema inmunitario, se pueden identificar linfocitos T, linfocitos B, células natural killer (NK), macrófagos y células dendríticas (CDs, dendritic cells), entre otras. Las CDs participan en la activación de las células T y la citotoxicidad de las células NK y desempeñan un papel clave en la inducción y el mantenimiento de la inmunidad antitumoral. Sin embargo, su función de presentación antigénica puede perderse o ser ineficiente en el MAT. Creemos que las células dendríticas que se encuentran en el MAT juegan un papel fundamental en el desarrollo de los carcinomas mamarios. Nuestra hipótesis es que existen diferentes subpoblaciones y perfiles de maduración de las CDs en el MAT, y estos perfiles están asociados con rasgos tumorales de estos carcinomas mamarios. Inicialmente, nos proponemos como objetivo general estudiar los diferentes tipos de CDs presentes en el MAT y determinar el perfil de estos diferentes subtipos en carcinomas de mama humanos. Metodología: Una vez obtenidos los tumores mediante cirugía, las fracciones derivadas del carcinoma de mama se desagregaron mecánica y enzimáticamente. Se aislaron poblaciones tumorales (EpCAM +) y no tumorales (EpCAM-) de cada fracción, usando citometría de flujo para la clasificación celular. Las poblaciones de CDs se caracterizaron mediante citometría de flujo, y para realizar la estrategia de selección, se utilizaron los siguientes marcadores de superficie celular: HLA-DR, CD14, CD11c, CD1c. Resultados: Luego de realizar los experimentos, se aislaron poblaciones tumorales y no tumorales derivadas de fracciones de ocho carcinomas mamarios humanos. Definimos cuatro subpoblaciones de CDs diferentes presentes en la MAT: células dendríticas plasmocitoides (pDC), células dendríticas inflamatorias (iDC) y células dendríticas convencionales (cCD1 y cCD2), y una quinta población con características de monocitos-macrofagos que llamamos MonoMacs. Observamos que cada fracción tumoral tiene un perfil de CDs único, esto podría deberse a la gran heterogeneidad intertumoral descrita para este tipo de tumores. Además, cuando estudiamos la cohorte de tumores en general, encontramos una correlación negativa entre las poblaciones de células tumorales y las células cDC2 (r = -0,76, p