Efecto de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) sobre la apoptosis de c¨¦lulas adenohipofisarias.

RADL D; FERRARIS J; ZÁRATE S; JAITA G; EIJO G; ZALDIVAR V; SEILICOVICH A; PISERA D

Mar del Plata

Congreso; LII Reuni¨®n de la Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica; 2007

Efecto de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) sobre la apoptosis de c¨¦lulas adenohipofisarias Radl D, Ferraris J, Z¨¢rate S, Jaita G, Eijo G, Zaldivar V, Seilicovich A, Pisera D. Instituto de Investigaciones en Reproducci¨®n, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires Hemos observado que la dopamina (DA) induce apoptosis de c¨¦lulas adenohipofisarias previamente sensibilizadas por los estr¨®genos. La auto-oxidaci¨®n de DA podr¨ªa conducir a la formaci¨®n de 6-OHDA, un metabolito oxidativo que induce muerte celular. La participaci¨®n del transportador de DA (DAT) en la muerte inducida por 6-OHDA es controvertida. Con el objeto de evaluar si este metabolito est¨¢ involucrado en la muerte de c¨¦lulas adenohipofisarias inducida por DA, estudiamos la acci¨®n apopt¨®tica de 6-OHDA (determinada por TUNEL)  en cultivos primarios provenientes de ratas ovariectomizadas incubadas en presencia de veh¨ªculo (VEH) o 17¦Â-estradiol (E2, 10-9 M). 6-OHDA (10-6 M, 4 h) aument¨® el porcentaje de c¨¦lulas TUNEL positivas  independientemente de la presencia de estr¨®genos (VEH: 2.2 % vs VEH+6-OHDA: 17.7, p<0.01; E2: 5.1 vs E2+6-OHDA: 10.3, p<0.01, c2). Por otro lado evaluamos la participaci¨®n de DAT en este efecto. El bloqueo de DAT (GBR12909, 10-8 M) inhibi¨® la apoptosis inducida por 6-OHDA (CONTROL: 3.5 % vs 6-OHDA: 7.8, p<0.01; GBR: 3.1 vs 6-OHDA+GBR: 2.1, n.s, c2). Ha sido reportado que la DA induce apoptosis de c¨¦lulas GH3 luego de su internalizaci¨®n por DAT. Por ello, estudiamos la participaci¨®n de este transportador en la apoptosis de c¨¦lulas adenohipofisarias (TUNEL) inducida por DA (10-6 M, 4 h). El bloqueo de DAT, no afecto la acci¨®n proapopt¨®tica de la DA  (CONTROL: 1.4 % vs DA: 7.2,  p<0.01; GBR: 1.2  vs GBR+DA: 6.4  p<0.01, c2). A diferencia de lo que hemos observado con DA, el efecto proapopt¨®tico de 6-OHDA es independiente de la presencia de estr¨®genos. Por otra parte, la internalizaci¨®n mediada por DAT es un proceso necesario para la inducci¨®n de apoptosis por 6-OHDA, mientras que este transportador no estar¨ªa involucrado en los efectos proapopt¨®ticos de la DA. Estos resultados sugieren que la auto-oxidaci¨®n a 6-OHDA no estar¨ªa involucrada en la apoptosis inducida por DA en c¨¦lulas adenohipofisarias.