Estudio comparativo de especies de Malassezia aisladas de pacientes con dermatitis seborreica y personas sanas

SOSA MA; ROJAS F; GIUSIANO G; MANGIATERRA M; BLANCO N

Jornada; Reunión de Comunicaciones Cintíficas y Teconlógicas 2010. Universidad Nacional del Nordeste; 2010

Universidad Nacional del Nordeste

El género Malassezia es miembro de la biota cutánea normal humana. Bajo la influencia de ciertos factores puede volverse patógeno y asociarse a distintos desórdenes dermatológicos como la dermatitis seborreica (DS). El objetivo de este estudio fue comparar la prevalencia de las especies de Malassezia en DS y piel de personas sanas y establecer la distribución de las especies de acuerdo al sitio de la lesión. Las muestras fueron obtenidas por raspado de piel en zonas de: cara, cuero cabelludo, cuello, brazos, espalda y pecho. Se sembraron en medio de Agar Dixon a 32ºC durante 7 días. Se aislaron 174 cepas de Malassezia, 138 provenientes de lesiones de DS y 36 cepas provenientes de piel de personas sanas (FN). La tipificación de las especies de Malassezia se realizó por la técnica PCR-RFLP. La extracción de ADN de las levaduras aisladas se llevo a cabo por shock térmico. El ADN obtenido se amplificó utilizando los cebadores descriptos por Mirhendi et al. (5´-TAA CAA GGA TTC CCC TAG TA -3´ y 5´-ATT ACG CCA GCA TCC TAA G -3´). El programa de amplificación incluyó una desnaturalización inicial a 94ºC (5 min), seguido por 30 ciclos de 94ºC (45s), 55ºC (45 s) y 72ºC (1 min), con una extensión final a 72ºC (7 min). Los productos de la PCR fueron sujetos a RFLP (análisis del polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción) utilizando las enzimas de restricción Cfo I (Promega) y Mbo I (Fermentas). Los fragmentos digeridos fueron separados por electroforesis en gel de agarosa al 2,5 % a 96 V durante 1 hora y media y teñidos con bromuro de etidio (0.5 g/ml). De las lesiones de DS se obtuvieron 128 cepas como agente único y 10 cepas distribuidas en 3 asociaciones. La distribución de las especies fueron: M. globosa (42.7%), M. furfur (20.3%), M. sympodialis (16.7%), M. restricta (16.7%), M. slooffiae (2.9%) y M. pachydermatis (0.7%). De piel sana se obtuvieron 36 aislamientos como agente único. La distribución de las especies fueron: M. globosa (36.1%), M. furfur (19.4%), M. sympodialis (38.8%), M. restricta (5.5%). M globosa fue aislada en mayor proporción en lesiones de DS especialmente en cuero cabelludo, sin embargo en pacientes de piel sana, M. globosa y M. sympodialis mostraron distribución similar. En DS M. restricta se aisló en una proporción mayor a 3 veces que en FN. Es destacable el aislamiento de M. pachydermatis, especie primariamente zoofilica, en una lesión de DS. La ecología del género Malassezia y el rol de cada una de sus especies en las distintas alteraciones de la piel se encuentran todavía en estudio. Este trabajo es una contribución a este conocimiento.