AUTOFLUORESCENCIA DE Thecaphora frezii, AGENTE CAUSAL DEL CARBÓN DEL MANÍ

FIGUEROA, A.; DIAZ, S.; TURCO, M.; ALASINO, V.; SORIA, N; BELTRAMO, D.

Exposici�n; 5º CONGRESO ARGENTINO DE FITOPATOLOGÍA 59º REUNIÓN DE LA APS DIVISIÓN CARIBE; 2021

Thecaphora frezii es un hongo que afecta el cultivo de maní causando grandes pérdidas económicas. Las teliosporas tienen escaso poder germinativo in vitro, lo que dificulta determinar su viabilidad. Considerando la autofluorescencia previamente observada en hifas y basidiosporas, la cual aumenta con ciertos tratamientos; el objetivo fue estudiar si la quitina, es la molécula responsable de la fluorescencia y si esta fluorescencia puede ser un indicador del estado metabólico de tales esporas. Para ello, las teliosporas se trataron con agentes oxidantes (hipoclorito y peróxido de hidrogeno), pH alcalino (hidróxido de sodio) o calor (25 a 200°C) por 3hs. Se agregó como control esporas sin tratar y una muestra de quitina comercial. Luego se observaron las esporas por microscopia de fluorescencia, compararon entre tratamientos y se tiñeron con calcofluor (tiñe quitina). Se extrajo el DNA de las esporas tratadas con calor y se comparó en gel de agarosa al 1%. Observamos en las teliosporas un marcado incremento de autofluorescencia con los tratamientos oxidantes y térmicos, no así con el alcalino y una importante degradación del DNA con el aumento de la temperatura. El agregado de calcofluor tiñó algunas esporas, pero no coincidió con la fluorescencia propia, lo que si ocurrió con quitina. Esto sugiere que la autofluorescencia estaría vinculada a la viabilidad de las esporas, ya que las esporas con mayor fluorescencia tuvieron menor integridad del DNA, lo que no les permitiría germinar. Además, las esporas más autofluorescentes no se tiñeron con calcoflúor revelando que quitina no es la responsable de esta fluorescencia.