Relación entre fragmentos de Fibronectina (Fn) de alta afinidad por la heparina y la proteasa que cliva al factor von Willebrand (VWFCP)

KEMPFER, ANA C; CARBALLO GONZALO A; FARÍAS, CRISTINA; SILAF MARÍA R; AMARAL MARÍA M; WOODS ADRIANA I; LAZZARI, MARÍA A

Mar del Plata

Congreso; SAIC Sociedad Argentina de Investigación Clínica XLVI Reunión Científica SAI Sociedad Argentina de Inmunología XLIX Reunión Científica; 2001

SAIC-SAI

Hemos descrito que fragmentos (F) proteolíticos de Fn (producida en nuestro laboratorio) de afinidad por la heparina degradan al factor von Willebrand (VWF) purificado en forma similar a la VWFCP. En este trabajo utilizamos, a partir de Fn comercial, estos mismos F (afinidad creciente), (FI=175 µg, FII= 26µg, FIII= 5µg) y F comerciales de 30 kD (150µg) con afinidad a heparina, F de 40 kD (150µg) a gelatina, F de 70 kD (150µg) heparina y gelatina, anticuerpo a-VWFCP (420µg, IgG de un paciente con PTT no familiar), VWFCP (3.5µg) parcialmente purificada. A estas muestras (184 µL), cuya proteasa se activa con BaCl2 (0.02M), se le agrega VWF purificado (1.84µg). Para exponer el sitio proteolítico del VWF se realiza una diálisis con urea (1.5M) durante 19h a 37ºC. El % de la actividad proteásica sobre el VWF de las muestras respecto a la de un pool de plasmas normales se evalúa midiendo el enlace del VWF al colágeno. El VWF:Ag se mide por ELISA. El rango del % de la actividad proteásica (n=3) fue: FI= [0-12 ], FII= [77-102], FIII= [20-43], F 30kD=[85-102], F45kD= [4-24], Fg 70kD= [0-30], VWFCP= [73-102], FII+a-VWFCP=[12-50],FIII+aVWFCP=[3-12], F 30kD +a-VWFCP=[90-100],Fg 45kD+a-VWFCP=[2-14], VWFCP+a-WFCP=[0-10]. El VWF:Ag de los productos de diálisis no indicó adsorción. Los resultados indican: que los F de Fn de alta afinidad por la heparina y no por la gelatina tienen actividad proteásica y que el FII contiene la VWFCP ó a una sustancia con sitios antigénicos similares.