Análisis de las caracteristicas estructurales del factor von Willebrand leucocitario

SAVINO JESSICA; LAZZARI MARÍA A; KEMPFER ANA C; AMARAL MARÍA M; MAUGERI NORMA

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) XLVII Reunión Científica Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) L Reunión Científica; 2002

SAIC-SAI

Hemos descripto que los PMN circulan con factor von Willebrand (VWF) asociado establemente a su superficie, mientras que otros grupos demostraron la unión del dominio A2 a las integrinas leucocitarias. Sabiendo que el VWF es clivado por las proteasas leucocitarias, nos propusimos analizar las características estructurales del VWF asociado a los PMN circulantes. Se compararon las muestras de VWF obtenido de plaquetas (VWF-p) y PMN (VWF-L) de individuos sanos así como el de un concentrado comercial (VWF-c). Por el análisis del patrón multimérico (método de Aihara) vimos que el VWF-L sólo presenta multímeros de muy bajo peso molecular (n=4). El análisis por western blott, en condiciones de no reducción demostró el VWF-L presenta solo dos bandas de aproximadamente 80 y 30kDa (las cuales desaparecen en condiciones de reducción). Estos valores coinciden con los descriptos por Remuzzi, para las formas de VWF que contienen únicamente los dominios A1-A2-A3. La coincubación del VWF-c con proteasas leucocitarias (PMN estimulados con fMLP 1µM, citocalacina B 2.5µg/mL, 10 min, 37°C) no generó la aparición de las bandas de 80 y 30 kDa observadas en VWF-L (n=6). Nuestros resultados indican que el VWF leucocitario es de muy bajo peso molecular, probablemente dimérico, y que su estructura no parecería ser consecuencia del efecto de las proteasas leucocitarias.