Estudio Cuali- Cuantitativo del factor von Willebrand (VWF) liberado de cultivos de HUVEC

AMARAL MARÍA M; POWAZNIAK, YANINA; FARÍAS CRISTINA; VERA, EZEQUIEL; KEMPFER ANA C; LAZZARI MARÍA A

Mar del Plata

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC, SAI, SAFE, SAB, SAB, SAN, SAF

En cultivos de HUVEC la concentración de VWF liberado constitutivamente y almacenado en los cuerpos de Weibel-Palade (CWP) disminuye a partir del tercer pasaje celular (PC)(Lopes, 2001). Esto indicaría variaciones cuantitativas en las vías constitutiva y regulada. También existe un aumento del número de los CWP en el segundo PC y una disminución en el tercero (Kuyonaga, 2001). Estas variaciones cuantitativas implícitamente reflejan variaciones cualitativas celulares. Una de las posibles alteraciones cualitativas estaría vinculada con el contenido de las vesículas constitutivas; dado que el pro-VWF (propéptido unido al VWF) se detecta en la vía constitutiva, si existe una variación en su concentración respecto al VWF, interferirá o dejará de interferir sobre el enlace del VWF con el FVIII (r = %VWF:FVIII / %VWF:Ag). Estudiamos el VWF liberado de cultivos en los tres primeros PC (n=8) mediante la determinación de: VWF: Ag y el r por ELISA. La relación de pro-VWF/VWF:Ag se analizó por SDS-PAGE (condiciones reducidas), transferencia a nitrocelulosa y detección inmunoenzimática. Por densitometría se obtuvieron las intensidades relativas del monómero de pro-VWF y del monómero de VWF. Los resultados se observan en la Tabla. La comparación de las variables entre los PC indicó que sólo existen diferencias significativas para el VWF: Ag entre el primer y tercer PC (p=0.034) y entre el segundo y el tercero (p=0.009). Nº de PC VWF:Ag(ng/millón cels) r relación pro-VWF/VWF:Ag 1 180±70 1.13±0.36 0.28±0.17 2 205±70 0.98±0.15 0.16±0.08 3 112±40 1.01±0.37 0.22±0.16 Las variables cualitativas elegidas no acompañaron a las variaciones cuantitativas del VWF liberado de la vía constitutiva en los pasajes celulares analizados.