Leukotriene C4 enhances antigen uptake through its action on receptors LTRI expressed in dendritic cells

ALVAREZ CAROLINA; AMARAL MARÍA M; NAHMOD KAREN; GEFFNER JORGE; VERMEULEN MÓNICA

Viña del Mar

Congreso; 9th Latin American Congress of Immunology; 2009

ALAI

Los cisteinil-leucotrienos (C4, D4 y E4) son mediadores lípidicos derivados del ácido araquidónico. Son potentes mediadores inflamatorios secretados por los mastocitos, basófilos, eosinófilos y macrofágos. Actúan como potentes espasmógenos y promueven la secreción de moco. Previamente, demostramos que el leucotrieno C4 (LTC4), incrementa la expresión de CD86 y la captación antigénica por las células dendríticas (CD). El objetivo de este trabajo, fue profundizar en los mecanismos involucrados en esta modulación. Las CD se obtuvieron a partir de precursores de medula ósea de ratones C57BL/6 en presencia de GM-CSF. Las CD se incubaron con antagonistas de los receptores LTB1 o LTB2 (1μM) por 1 h, se lavaron y se trataron o no con LTC4 (0.01μM) por 30 min. a 37οC, y se analizó la internalización de Dextran- FITC (DX) y zymozán-FITC (Zy) por citometría de flujo. Encontramos que el bloqueo del receptor LTB1 con el antagonista montelukast (Mtk) revirtió el incremento en la captación de Zy en CD tratadas con LTC4 (media de la intensidad de fluorescencia (IF) ±ES; Ct: 180 ±15; LTC4, 249±21; Mtk, 157±15; Mtk+LTC4, 174±13, n=4; p≤0.05. Por el contrario, la endocitosis de DX fue parcialmente bloqueada por los antagonistas de ambos receptores. Luego, evaluamos los mecanismos a través de los cuales el LTC4 potencia la captación antigénica. Observamos que el empleo de manano (Mn), un inhibidor del receptor de manosa, contrariamente a lo esperado, incremento la captación de DX en CD tratadas con LTC4, alrededor del 15% vs CD LTC4 no incubadas con Mn.Finalmente, estudiamos las principales vías de activación en CD. Llamativamente, encontramos una potente inducción de P-p38 cuando las CD fueron expuestas al LTC4 por 30 min, por el contrario no encontramos activación de ERK1/2 ni Akt. Los resultados podrían indicar que las CD expuestas al LTC4 a través de la activación de la p38 adquieren un mayor potencial para captar el antígeno vía los receptores LTI y/o LTRII.