Microvesículas portadoras de toxina Shiga tipo 2 (mvs-stx2) como un nuevo biomarcador clínico para el diagnóstico rápido de pacientes con riesgo de desarrollar síndrome urémico hemolítico (SUH).

FERNANDO GÓMEZ; FLAVIA SACERDOTI; DANIEL GIRÓN REYES; CARLA PASCUALE; TOMÁS LOMBARDO; ROXANE MARIA FONTES PIAZZA; LAURA ALCONCHER; MARÍA MARTA AMARAL

Buenos Aires

Workshop; I WORKSHOP ANUAL DEL GRUPO ARGENTINO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES; 2023

GRUPO ARGENTINO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES

En Argentina, el Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) causado por la infección por Escherichia coli (STEC) productora de toxina Shiga (Stx-HUS) es una enfermedad endémica y una de las causas más comunes de injuria renal aguda en niños. Hasta el presente, el diagnóstico de SUH se realiza a partir de la clínica del paciente (diarrea sanguinolenta, vómitos, fiebre) y se confirma por la identificación de Stx y/o STEC en materia fecal. Sin embargo, el diagnóstico llega cuando el paciente superó la fase diarreica la cual puede resolverse espontáneamente o evolucionar a los distintos grados de severidad del SUH. Las concentraciones de Stx en la sangre de los pacientes infectados con STEC son prácticamente indetectables debido a que la toxina circula principalmente unida a células sanguíneas y microvesículas (MVs). MVs derivadas de plaquetas y leucocitos se han detectado en el plasma de pacientes con STEC-HUS. El objetivo de este trabajo fue analizar la presencia de Stx2 en MVs (MVs-Stx2) a partir de muestras de sangre de dos pacientes pediátricos que fueron admitidos en el Hospital Prof. Alejandro Posadas con diarrea sanguinolenta. Dos días después de la admisión, se obtuvieron muestras de sangre de estos pacientes (P1 y P2) y se ultracentrifugaron secuencialmente para obtener una suspensión enriquecida en MVs. Además, se reclutaron cinco controles sanos de la misma edad. Luego, las MVs se marcaron con Anexina V-FITC y las MV-Stx2 se detectaron mediante un anticuerpo monoclonal anti-Stx2 y un anticuerpo secundario conjugado a Alexa Fluor 647. Finalmente, las MVs se analizaron por citometría de flujo. Los resultados se expresaron como porcentaje de MVs-Stx2 positivas. A partir de los controles se estableció un punto de corte para MVs-Stx2 positivas. Ambos pacientes exhibieron un porcentaje significativamente mayor de MVs-Stx2 en circulación respecto a los controles (P1: 3,63 %, P2: 5,20 %, vs. 1,02-1,90 %, n = 5 p