Detección de la capacitación espermática basada en la visualización de los componentes lipídicos de microdominios de membrana

BOARELLI P.V; CATTANEO C.B.; MONCLUS MA; FORNES MW

Revista Médica Universitaria. Facultad de Ciencias Médicas, U.N. de Cuyo.

Año: 2007 vol. 3 p. 1 - 5

1669-8991

Detección de la capacitación espermática basada en la visualizaciónde los componentes lipídicos de microdominios de membrana.Boarelli P. V., Cattaneo C. B., Monclus M. A., Fornés M.Área de Histología y Embriología. Departamento de Morfología yFisiología. Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional deCuyo y Laboratorio de Investigaciones Andrológicas (LIAM), Institutode Histología y Embriología (IHEM). Consejo Nacional de InvestigacionesCientíficas y Técnicas (CONICET).Palabras clave: espermatozoide, capacitación, microdominioKey words: sperm, capacitation, raftResumenDurante la capacitación espermática se produce una reestructuración decomponentes de membrana íntimamente relacionada con la función espermática;específicamente en estructuras definidas en otros tipos celularesy denominadas microdominios de membrana. Los componentes principalesinvolucrados son el colesterol y los esfingolípidos (GM1), que a suvez están asociados a proteínas específicas constituyendo una unidad. Enel presente trabajo se utilizó como modelo experimental espermatozoidesde ratón adulto. Se dividieron en dos grupos: control (bajo condiciones deno capacitación) y experimental (bajo condiciones de capacitación). Paralocalizar los componentes de los microdominios de membrana se empleó:Filipin III como marcador para colesterol y fracción ß de la toxina coléricaconjugada con el fluorocromo AlexaFluor 594® como marcador de GM1.Filipin III es un antibiótico que presenta fluorescencia per se y la fracciónß de la toxina colérica se encuentra conjugado con un fluorocromo, lo quepermite la visualización de los componentes de los microdominios demembrana a través de microscopía de fluorescencia.Los espermatozoides control tratados con filipin III presentan una señal defluorescencia más intensa en la región acrosomal en comparación con losespermatozoides experimentales, lo que confirma la pérdida de colesterolque se produce durante la capacitación. En los espermatozoides tratadoscon toxina colérica se observa la redistribución de GM1 desde la regiónacrosomal (control) hacia la postacrosomal (experimental). En este trabajose demuestra que la detección de los componentes lipídicos son marcadoresde capacitación espermática, como es la fosforilación en tirosina.