Incorporación de triptófano en membranas. Estudio mediante espectroscopía de fluorescencia y dinámica molecular

AGUSTIN GONZALES PAZ; MARCELO ARIAS; HUGO A. PÉREZ

La Plata

Congreso; XXII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2021

Universidad Nacional de la Plata

Introducción: Estudios previos revelaron que muchas proteínasasociadas a la membrana están constituidas por los aminoácidos aromáticos Phe,Tyr y Trp expuestos a la membrana [1?3]. Sin embargo, a nuestro entender, existen pocosestudios de este sistema desde el punto de vista de la hidratación de lamembrana. Es por ello que se estudiara el ingreso de Trp en vesículas de estery éter PC utilizando espectroscopia de fluorescencia y Dinámica Molecular.Resultados: Laintensidad de emisión del Laurdan disminuye con la concentración de Triptófano(Trp) en las vesículas de DMPC, DTPC, DPPC y DHPC, tanto por arriba como pordebajo de la temperatura de transición. Esto sugiere que el Trp tiene algún tipo de interacción con la sonda. Apartir de la ecuación de Stern-Volmer, se obtuvieron los valores de constante KSVpara cada lípido. Para DMPC y DTPC, no se encontró un cambiosignificativo de KSV en ambas fases (KSV = 72 ± 2). Sin embargo, si se detectó diferencias paraDPPC y DHPC, siendo mayor en líquido cristalino (LC) (KSV = 81 ± 1) que en fase gel (KSV = 57 ± 3). Por otro lado, no se determinaronmodificaciones significativas en las propiedades espectrales del Laurdan tales como FWHM, ng y GPex.Los estudios dedinámica molecular mostraron que el parámetro de orden de la cadena de acilo(-SCD), área por lípido (A) y grosor de la bicapa (DB),en ausencia y presencia de Trp, no presentaban variaciones significativas en lasmembranas de estudio independientemente del estado de fase. Asimismo,los perfiles de densidad de Trp en DMPC y DTPC son similares en ambas fases,pero para DPPC y DHPC se observa un mayor perfil en líquido cristalino,relacionándose este fenómeno con los datos de KSV obtenidos porfluorescencia.Conclusiones:Losresultados mostraron que el ingreso de Trp en las membranas de fosfolípidos nose ve afectado por la presencia o ausencia del grupo carbonilo. Además, laincorporación de Trp no modifica la organización de las moléculas de agua en lainterfase. Por otro lado, se destaca un mayor ingreso de Trp en DPPC y DHPC enLC. Esto último podría deberse a la mayor difusión lateral de estos lípidos enesa fase, lo que facilitaría el ingreso de Trp.