POTENCIACIÓN DE LA INMUNOGENICIDAD DEL VIRUS VACCINIA ANKARA MODIFICADO TRAS LA DELECIÓN DEL GEN VIRAL QUE CODIFICA PARA UNA PROTEÍNA DE UNIÓN A IL-18

ANA MAR¨ªA RODRIGUEZ; FALIVENE JULIANA; M.P. DEL MEDICO ZAJAC; MAR¨ªA FERNANDA PASCUTTI; CYNTHIA MAETO; G.CALAMANTE; GHERARDI MAR¨ªA MAGDALENA

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Virologia; 2011

Objetivo: El virus Vaccinia Ankara Modificado (MVA) es una cepa atenuada del virus Vaccinia (VV) utilizada actualmente en ensayos cl¨ªnicos de vacunas contra HIV/SIDA. MVA a¨²n posee genes involucrados en la evasi¨®n del sistema inmune del hu¨¦sped, posibilitando su optimizaci¨®n mediante la deleci¨®n de algunos de ellos. El objetivo de este trabajo consisti¨® en la evaluaci¨®n de la respuesta inmune celular (RIC) inducida por un MVA delecionado en el gen que codifica para una prote¨ªna de uni¨®n a IL-18 (MVADIL-18bp). Materiales y m¨¦todos: Ratones BALB/c y C57BL/6 se inmunizaron con diferentes dosis de MVADIL-18bp o MVA salvaje (wild type, MVAwt), luego se evalu¨® la RIC frente a ep¨ªtopes de VV en bazo y ganglios drenantes en la fase aguda y de memoria (7 y 40 d¨ªas post-inmunizaci¨®n respectivamente). La proporci¨®n de c¨¦lulas productoras de IFN-g e IL-2 se evalu¨® por ELISPOT. El porcentaje de c¨¦lulas TCD8+ citot¨®xicas se analiz¨® por citometr¨ªa de flujo mediante el marcador de superficie CD107a/b. El nivel de protecci¨®n otorgado tras un desaf¨ªo intranasal con la cepa replicativa Western Reserve (WR) se evalu¨® en la fase de memoria midiendo el peso individual de ratones BALB/C durante dos semanas. Finalmente, la RIC contra ant¨ªgenos de HIV-1 expresados desde los vectores de MVA se analiz¨® por ELISPOT utilizando esquemas de inmunizaci¨®n de prime-DNA/boost-MVA. Resultados: Comparado con MVAwt, la inmunizaci¨®n con MVA¦¤IL-18bp indujo un incremento significativo de dos o tres veces en las respuestas TCD8+ (p<0.01) y TCD4+ (p<0.05) contra diferentes ep¨ªtopes de VV, y aument¨® el porcentaje de c¨¦lulas TCD8+ citot¨®xicas (p<0.05) en la fase aguda. Tambi¨¦n se observ¨® potenciaci¨®n de la inmunogenicidad de MVA en la fase de memoria, en correlaci¨®n con un mayor grado de protecci¨®n frente a un desaf¨ªo intranasal con WR. M¨¢s importante a¨²n, tambi¨¦n se observ¨® un aumento en la RIC contra el ant¨ªgeno de HIV-1 Nef del intersubtipo BF expresado desde MVADIL-18bp en esquemas de vacunaci¨®n prime-DNA/boost-MVA. Conclusiones: IL-18bp contribuye a la evasi¨®n de la respuesta inmune durante la infecci¨®n con MVA, dado que su deleci¨®n del genoma viral potenci¨® la inmunogenicidad de MVA observada frente a ant¨ªgenos del propio vector y m¨¢s importante a¨²n contra ant¨ªgenos de HIV