La infección de células dendríticas humanas por el virus Vaccinia Ankara modificado induce la maduración fenotípica y funcional de células dendríticas vecinas

MARÍA FERNANDA PASCUTTI; ANA MARÍA RODRIGUEZ; JULIANA FALIVENE; M.MAGDALENA GHERARDI

Salta

Congreso; Congreso Nacional de SIDA; 2009

SAISIDA

El virus Vaccinia Ankara modificado (MVA) es una cepa atenuada del virus Vaccinia que se está evaluando como vector en numerosos ensayos clínicos de vacunas contra HIV/SIDA. En este campo se ha hecho evidente, en los últimos años, la importancia de conocer en detalle la respuesta inmune generada por el vector vacunal. Si bien se ha demostrado que MVA es capaz de inducir una respuesta específica de células T en humanos, aún no se conocen algunos aspectos del proceso de generación de esta respuesta. Se sabe que MVA induce una maduración fenotípica moderada de células dendríticas (CD), responsables de la inducción de la respuesta específica, pero se desconoce de qué forma las CD infectadas activan a las células T. En un trabajo previo demostramos que la infección de CD humanas por MVA induce un aumento de la expresión de moléculas co-estimulatorias y de HLA y que, además, estas CD son capaces de inducir un aumento en los marcadores de activación CD38 y CD69 y la producción de IFN- en células T CD4+y CD8+ alogeneicas. El objetivo de este trabajo fue evaluar algunos mecanismos por los cuales estas CD maduran y adquieren la capacidad de activar células T. Para ello, se diferenciaron CD a partir de monocitos humanos en presencia de IL-4 y GM-CSF durante 6 días y luego se infectaron con una cepa de MVA que expresa GFP. El análisis de la expresión de marcadores de activación por citometría de flujo a las 24 horas reveló que un aumento significativo en la expresión de CD86 únicamente en las células no infectadas del cultivo (GFP-). Para evaluar si las CD infectadas pueden activar CD vecinas por contacto directo o a través de mediadores solubles, se infectaron CD con MVA a MOI=5 y a las 24 hs se separaron las CD infectadas del sobrenadante de cultivo. Luego, CD homólogas se incubaron con cantidades crecientes de las CD infectadas o sobrenadante. En ambos casos se observó un aumento dosis-dependiente de la expresión de CD86 y HLA-DR en las CD homólogas. Estas CD fueron capaces, en un cultivo mixto, de inducir la producción de IFN- en células T CD4+y CD8+ alogeneicas. Estos resultados sugieren que las CD infectadas por MVA poseen diversos mecanismos capaces de inducir la maduración fenotípica y funcional de CD vecinas, tanto a través de mediadores solubles como mediante el contacto directo. Dado que el aumento de moléculas co-estimulatorias se observó únicamente en CD vecinas, es posible que éstas sean las principales responsables de la activación de células T.