INVESTIGADORES
AMWEG Ayelen Noelia
congresos y reuniones científicas
Título:
Expresión del correpresor de la actividad de receptores de estrógenos en folículos ováricos bovinos normales y quísticos
Autor/es:
ALFARO, NATALIA S.; SALVETTI, NATALIA R.; RODRIGUEZ, FERNANDA M.; PANZANI, CAROLINA G.; AMWEG, AYELEN N.; ORTEGA, HUGO H.
Reunión:
Jornada; XII Jornadas de Divulgación Técnico Científicas, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR. Joranda Nacional de Divulgación Técnico Científica 2011 UNR-UNL.; 2011
Resumen:
El
represor de la actividad del receptor de estrógeno (REA) es una proteína correpresora dependiente de
ligando que interacciona específicamente con los receptores de estrógenos (RE)
suprimiendo marcadamente su actividad transcripcional, pero no la de los otros
receptores de hormonas esteroides y no esteroides. Además, REA compite por los
mismos sitios de unión al RE con el coactivador de receptor de esteroides 1
(SRC-1) actuando de este modo de manera anti-coactivador y correpresor.
Estudios realizados en ratones Knock Out (KO) para el gen REA mostraron
individuos no viables, sin embargo el uso de KO condicionados a ciertos órganos
(gen ausente solo en los órganos específicos para su estudio) mostraron que
este correpresor también tiene una acción importante en la regulación del REα
en los órganos reproductivos de la hembra. La enfermedad quística ovárica (del
inglés: Cystic Ovarian Disease: COD) es uno de los desórdenes reproductivos más
comunes en vacas lecheras. Numerosos autores han analizado la etiología de la
enfermedad considerando un desequilibrio a nivel del eje hipotálamo-hipófisis-gonadal
como la hipótesis más aceptada1. Sin embargo, estudios recientes sugieren que
la variación en los patrones de expresión de proteínas correguladoras presentes
en las células del ovario podría jugar un rol potencial en la disfunción ovárica.
A pesar del avance en el estudio de
estas moléculas en diversas condiciones no hemos encontrado antecedentes sobre
su expresión en el ovario bovino con COD. Es por eso que en este trabajo nos
propusimos evaluar el patrón de expresión del correpresor REA en las distintas
estructuras foliculares de ovarios sanos y con COD. Se utilizaron muestras de
ovarios obtenidas en frigorífico. Los ovarios fueron examinados para determinar
el diámetro folicular y la presencia o ausencia de cuerpo lúteo activo. De este
modo se clasificaron los ovarios como provenientes o no de vacas con COD. Las
muestras fueron reducidas e inmediatamente fijadas en formol al 10% durante
8hs, lavándose luego en buffer fosfato salino y procesándose siguiendo
protocolos de rutina para efectuar la inclusión en parafina. Luego, se
efectuaron cortes seriados, de 4 mm de espesor sobre los que se realizó una
técnica inmunohistoquímica indirecta para la determinación de REA. La reacción
fue revelada utilizando 3,3´ diaminobencidina como cromógeno2. La especificidad
del anticuerpo, se analizó por Western Blot en muestras de ovario. Se evaluó la
inmunoreacción en células de granulosa y
teca de folículos primarios (FP), secundarios (FS), terciarios (FT) de animales
con ciclos estrales normales y con quistes foliculares y folículos quísticos
(FQ).Los resultados se detallan en la tabla 1. Se encontró marcación
citoplasmática y nuclear con REA en
todos los estratos celulares de las categorías estudiadas. Se observó que en
todas las estructuras foliculares analizadas la expresión de REA fue mayor en
las células de la granulosa que en las de la teca. En folículos terciarios de
vacas sanas el patrón de marcación de REA fue significativamente mayor
(p<0.05) con respecto a folículos terciarios de vacas con la enfermedad y a
las estructuras quísticas. En teca externa se evidenció similar expresión de
REA a lo hallado en teca interna. Por Western Blot se detectó una banda a
aproximadamente 37 KDa que se correspondió con el peso molecular de REA.
Basados en estos resultados podríamos inferir que las alteraciones en la
expresión de REA podrían modificar los mecanismos de regulación de la
transcripción en las células foliculares ováricas, participando en la patogenia
de esta enfermedad.