EVALUACIÓN DE PROTOCOLOS DE IATF SOBRE LA EXPRESIÓN GENICA DE RECEPTORES ENDOMETRIALES EN VACAS DE CARNE

TRUCCO TF; ETCHEVERS, L; ANGELI, E.; AMWEG, AN; AHIBE ME; NOTARO, U.S.; SALVETTI, NR; ORTEGA, HH; DÍAZ, PU

Congreso; XXV Congreso Internacional ANEMBE de Medicina Bovina; 2023

La utilización de protocolos de sincronización hormonal que prolongan el tiempo de proestro ha sido relacionado con mayores tasas de preñez en programas reproductivos. Algunos autores sugieren que la exposición del endometrio a concentraciones séricas de estrógenos similares al proestro, por un periodo mayor de tiempo, da lugar a un ambiente endometrial más apto para la sobrevida del concepto en las etapas embrionarias iniciales. Los mecanismos biológicos involucrados en las mayores tasas de preñez alcanzadas por los protocolos comerciales de IATF que extienden el proestro están parcialmente comprendidas, dadas las complejas interacciones que tienen lugar alrededor del momento de fertilización y posterior desarrollo embrionario a nivel uterino. La biopsia endometrial y la realización de pruebas de biología molecular son una herramienta disponible para lograr una mejor compresión de los mecanismos celulares y moleculares que ocurren a nivel uterino. El objetivo del presente trabajo fue comparar el efecto de tres protocolos de IATF, dos con proestro corto y uno con proestro extendido, sobre la expresión génica de los receptores de estrógenos alfa (RE alfa), receptores de estrógenos beta (RE beta) y receptores de progesterona (RP) a nivel endometrial el día 15 postovulación. Se utilizaron 30 vacas Aberdeen Angus sin cría al pie, con un postparto ≥ 90 días y con una condición corporal promedio ≥ 3.5 (escala de 1 a 5). Las vacas fueron asignadas en forma aleatoria a cada uno de los 3 protocolos, seleccionándose sólo aquellas que presentaron un cuerpo lúteo (CL) y/o folículo dominante (FD) ≥10 mm al inicio del ensayo. El grupo 1 (proestro extendido) recibió el Día 0: un dispositivo de progesterona (P4 + 0,021 mg de GnRH. Día 5: retiro del dispositivo de P4 + 0,150 µg de PGF2α. Día 8: 0,021 mg de GnRH. El grupo 2 (proestro corto con GnRH) recibió el Día 0: un dispositivo de P4 + 0,021 mg de GnRH. Día 7: retiro del dispositivo + 0,150 µg de PGF2α. Día 9: 0,021 mg de GnRH. El grupo 3 (proestro corto convencional) recibió el Día 0: un dispositivo de P4. Día 7: retiro del dispositivo de P4 + 0,150 µg de PGF2α + cipionato de estradiol. Se obtuvieron muestras de tejido endometrial el día 15 postovulación mediante biopsias uterinas. Sobre una porción de las muestras uterinas se realizó una doble extracción de ARN total utilizando la técnica de Trizol (Invitrogen, ThermoFisher Scientific), con algunas modificaciones. A continuación, se realizó la transcripción reversa para obtener ADN copia utilizando la enzima Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase (Invitrogen). Finalmente, se evaluó la expresión génica relativa del RE alfa, RE beta y RP mediante PCR en tiempo real (QuantStudio 3, Applied Biosystem) utilizando cebadores de secuencias específicas. Los valores de CT fueron analizados mediante el método 2-ΔΔCT y los resultados se evaluaron mediante ANOVA y post test de Duncan. Se detectó la expresión génica de los tres receptores hormonales (RE alfa, RE beta y RP) evaluados en todas las muestras de biopsias uterinas. Sin embargo, los niveles de expresión génica de los receptores de interés resultaron ser similar entre los grupos en estudio (p>0.05). Si bien no observaron cambios en la expresión génica de los receptores de esteroides al día 15 postovulación, en estudios previos pudimos observar que existieron diferencias significativas en la concentración de P4 entre los grupos estudiados. Se detectaron mayores concentraciones en el grupo 1 de proestro extendido en relación a los grupos 2 y 3 con tiempos de proestro corto (P