FORMACIÓN DE BIOFILM Y COLONIZACIÓN DE RAÍCES DE TOMATE POR Azospirillum brasilense EN CONDICIONES DE ESTRÉS SALINO.

SALCEDO FLORENCIA; LAMATTINA LORENZO; CREUS CECILIA

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología II Congreso de Microbiología Agrícola Ambiental; 2013

Asociación Argentina de Micobiología

Azospirillum brasilense pertenece al grupo de bacterias promotoras del crecimiento vegetal y es capaz de asociarse a las raíces de una amplia variedad de vegetales de importancia agronómica. Para lograr una efectiva colonización de la raíz es necesaria la formación de un biofilm bacteriano estable. Se ha mostrado que la presencia de alta concentración de NaCl en el medio de crecimiento bacteriano afecta la adhesión a la raíz, sin embargo no se ha estudiado en esta bacteria el efecto de la salinidad sobre la formación de biofilm. El objetivo de este trabajo fue estudiar el crecimiento en condiciones estáticas, la formación de biofilm in vitro y la colonización de raíces de tomate por A. brasilense Sp245 en medios con NaCl. La bacteria fue crecida en placas de poliestireno, en medio NFb-NO3- con el agregado de 200, 300 ó 350 mM de NaCl, a 32ºC sin agitación durante 2 días. Se determinó el crecimiento total espectrofotométricamente y la formación de biofilm por la técnica de cristal violeta. El ensayo de colonización se realizó inoculando semillas de tomate ACE 55 con 105 bacterias semilla-1, las plántulas crecieron en cámara a 25ºC con fotoperíodo de 8 hs, sobre agar 0,8% con el agregado o no de 100 mM de NaCl. El grado de colonización se determinó cuantificando el número más probable (NMP) de bacterias por gramo de PF de raíz en medio NFb semisólido. Para visualizar la formación de biofilm bacteriano sobre la raíz, se inoculó con 105 células de A. brasilense Sp245 Pmp2444 (Gmr, contiene un plásmido con el constructo Plac-egfp) por semilla. Las raíces fueron observadas con microscopio de fluorescencia. Los resultados mostraron que el crecimiento bacteriano en forma estática no fue afectado por 200 mM de NaCl, evidenciando la resistencia ya reportada de esta bacteria a la salinidad. Sin embargo, concentraciones mayores de NaCl (300 y 350 mM) disminuyeron el crecimiento respecto del control. La formación de biofilm disminuyó en 200 mM de NaCl, mientras que en 300 y 350 mM de NaCl aumentó significativamente. La inoculación de las semillas de tomate promovió el crecimiento de la parte aérea de las plántulas tanto en condiciones control como salinas y el NMP de bacterias g-1 de PF de raíz fue superior a 1010, independientemente de la presencia de 100 mM de NaCl. En conclusión, concentraciones de NaCl mayores a 200 mM disminuyeron el crecimiento bacteriano en condiciones estáticas y aumentaron la formación de biofilm in vitro, mientras que la colonización de raíces de tomate no se vio afectada por 100 mM de NaCl.