Multilocus Sequence Typing: en busca de un nuevo método de referencia para la tipificación de aislamientos de Trypanosoma cruzi

JUAN JOSÉ LAUTHIER; NICOLÁS TOMASINI; MARÍA M. MONJE RUMI; ANAHÍ M. ALBERTI DAMATO; PAULA G. RAGONE; MIGUEL A. BASOMBRÍO; PATRICIO DIOSQUE

Congreso; XX Congreso latinoamericano de Parasitología; 2011

Introducción. Actualmente, la tipificación molecular de aislados de Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas,  se hace mediante técnicas basadas en el análisis visual de patrones de bandas. La técnica de tipificación  por secuenciación multilocus  tipificación (Multilocus Sequence Typing, MLST) Es una herramienta ideada originalmente para la tipificación de bacterias, la cual se basa en la secuenciación de genes metabólicos de copia simple  de aproximadamente 500 pb. Esta herramienta minimiza la interpretación subjetiva de datos, ya que se trabaja con secuencias de nucleótidos y, Además, presenta la ventaja de que los datos de secuencias son fácilmente intercambiables mediante bases de datos a través de Internet.Materiales y métodos. En el presente trabajo se analizaron fragmentos de 10 genes metabólicos en cepas de referencia de toda América y un conjunto de aislamientos provenientes de la provincia de Chaco, Argentina. Las secuencias obtenidas se manipularon de tres modos diferentes: i) Identificación de secuencias diploide tipo; ii) duplicación de sitios polimórficos, y iii) concatenación de la secuencia de los 10 fragmentos de genes estudiados. Estos datos se utilizaron para la construcción de árboles de Neighbor Joining.Resultados. Se obtuvieron árboles a partir de los cuales se identificaron los 6 DTUs de T. cruzi con altos valores de bootstrap. Se identificaron cinco  genotipos de TcI y dos de TcV para los aislamientos provenientes de la provincia de Chaco. Conclusiones. Los resultados obtenidos muestran que el enfoque de MLST representa una herramienta promisoria para la tipificación de aislamientos de T. cruzi, ya que presenta un gran poder resolutivo y es de fácil reproducibilidad, lo cual convierte al MLST en un excelente candidato a convertirse en el método de referencia para la tipificación molecular de aislamientos de T. cruzi.