EVALUACIÓN DIAGNÓSTICA DEL ANTÍGENO RECOMBINANTE AG1 DE TRYPANOSOMA CRUZIEN SUEROS DE PERROS

NOELIA FLORIDIA; RUBEN CIMINO; PAOLA A. VARGAS; ANAHÍ M. ALBERTI DAMATO; MARÍA M. MONJE RUMI; JUAN JOSÉ LAUTHIER; NICOLÁS TOMASINI; PAULA G. RAGONE; PATRICIO DIOSQUE; JULIO NASSER

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Tropicales; 2011

Sociedad Argentina de Protozoologia

Los perros constituyen un importante reservorio de T. cruzien la cadena epidemiológica de la transmisión de la enfermedad de Chagas en nuestro país por lo que los estudios tendientes a mejorar el diagnóstico de la infección en dichos animales son necesarios. El antígeno recombinante Ag1 ha demostrado una elevada reactividad en el diagnóstico de la enfermedad en humanos y es considerado marcador de fase crónica de la infección en los mismos pero no ha sido estudiado en perros. Se evaluó la capacidad diagnóstica utilizando el Ag1 en sueros de perros mediante la técnica de ELISA (ELISAAg1) tomando como prueba de referencia para la detección de la infección chagásica el ELISA-homogenado de T. cruzi. Para ELISA-Ag1 se plaqueó 0,5 µg por pocillo utilizando como diluyente buffer coating (pH=9,6) y se dejo reposar a 4°C overnight. La dilución de suero fue 1/50 y se dejó reaccionar 1 hora a temperatura ambiente. La dilución de anticuerpo 2° biotinilado (IgG total anti-dog) fue de 1/1250 y la dilución del conjugado (avidina-peroxidasa) fue de 1/8000. Para la evaluación diagnóstica se utilizaron 10 sueros controles negativos y 36 sueros de perros chagásicos provenientes de una zona endémica, que fueron positivos por ELISA-homogenado, de los cuales 12 fueron xenodiagnóstico positivo y 19 fueron positivos por ELISA-TSSA-II, sugiriendo posible infección por linaje TcVI. Se utilizó el programa EpiDat 3.1 para el cálculo la sensibilidad, especificidad y el índice de concordancia kappa. La prueba ELISA-Ag1 tuvo una sensibilidad del 44,4% (16/36) (IC95%: 26,8-62,1) y una especificidad del 100% (10/10). El índice de concordancia kappa entre ELISA-Ag1 y la prueba de referencia (ELISA-homogenado) fue de 0,2581 (IC 95%: 0,0942-0,442) indicando que la concordancia entre las mismas es mala (criterio: <0,4). El índice kappa comparando ELISA-Ag1 vs ELISA-TSSA-II fue de 0,5 (IC 95%: 0,22-0,78). Del análisis de la sensibilidad e índice Kappa, de acuerdo a la escala de Landis y Koch, la prueba ELISA-Ag1 utilizada en sueros de perros no es aconsejable.